Z Gastroenterol 2009; 47 - P051
DOI: 10.1055/s-0029-1241302

Expression von RPTPα moduliert den Schwellwert für physikalische Stimuli aus der extrazellulären Matrix und damit Spreading und Invasion in humanen Kolonkarzinomzellen

D Krndija 1, G Adler 1, T Seufferlein 2, G von Wichert 1
  • 1Klinik für Innere Medizin I, Ulm, Germany
  • 2Klinik für Innere Medizin I, Halle, Germany

Einleitung: Migration und Metastasierung von Tumorzellen hängt von der Interaktion mit der Extrazellulären Matrix ab. Die Rezeptor-Tyrosin-Phosphatase alpha (RPTPα) ist eine transmembrane Phosphatase, die mit Integrinen interagiert und die mechanisch induzierte Bildung von initialen fokalen Komplexen in Fibroblasten reguliert.

Ziele: Identifikation einer tumorspezifischen Funktion von RPTPα in humanen Kolonkarzinomen.

Methodik: Modulation der Expression über transienten und stabilen Knockdown. Chrakterisierung der Signaltransduktion in biochemischen Assays (Western Blot, Kinase Assay). Immunhistochemische Charakterisierung der Effekte auf das Zytoskelett und Adhäsionspunkte. Biophysikalische Charaktersierung der Effekte von RPTPα in der Matrixinteraktion.

Ergebnisse: Hier zeigen wir, dass Überexpression von RPTPalpha auf Kollagen I Matrizes nach initialem Matrixkontakt zu vermehrter Bildung von fokalen Kontakten und Stressfasern in humanen SW480 Kolonkarzinomzellen führt. Dieser Phänotyp wird über Src-Familien Kinasen und „Myosin light chain kinase“ vermittelt und ist unabhängig von der kleinen GTPase Rho und ihrem Effektor Rho-Kinase. Darüberhinaus können wir in Untersuchungen zur Deformation einer Kollagen-beschichteten Silikonmatrix zeigen, dass die RPTPα-Expression zu einer Zunahme der Einzelzellkontraktilität führt. Darüberhinaus reguliert RPTPα den Grenzwert für die Erkennung suboptimaler physikalischer Stimuli in Untersuchungen zur Bindung unterschiedlich großer, Kollagen-beschichteter Mikropartikel oder im Spreading auf definierten, elastischen, Kollagen-beschichteten Oberflächen. In Untersuchungen zu Expression von RPTPα in humanen Kolonkarzinomen konnte Expression spezifisch in den maligne transformierten Zellen nachgewiesen werden, während normale Kolonozyten keine Expression von RPTPα zeigten. In Invasions-Assays in die Chorion-Allantois-Membran eines Hühnereis konnten wir zeigen, dass Expression von RPTPα Voraussetzung für erfolgreiche Invasion ist.

Schlussfolgerung: Diese Daten beschreiben RPTPalpha als wichtigen Regulator der Matrixinteraktion und Identifizieren ein interessantes neues Ziel für therapeutische Strategien.