Subscribe to RSS
DOI: 10.1055/s-0029-1241521
Verschiedene Splicevarianten von Lef-1 vermitteln über die Kooperation mit verschiedenen Signalwegen unterschiedliche zelluläre Funktionen im Pankreaskarzinom
Einleitung: In vorhergehenden Arbeiten konnten wir zeigen, dass der nukläre Effektor des kanonischen Wnt-Signalweges, Lef-1 im Pankreaskarzinom v.a. in fortgeschrittenen Tumorstadien exprimiert wird und dass es zur Expression von zwei Splicevarianten von Lef-1 im Tumor kommt.
Ziele und Methodik: Ziel dieser Arbeit war es anhand von Zellkulturexperimenten die Funktion der verschiedenen Splicevarianten von Lef-1 im Pankreaskarzinom zu untersuchen sowie mögliche Mechanismen für unterschiedliche Funktionen der Varianten zu finden.
Ergebnis: Wir können in der vorliegenden Arbeit an Pankreaskarzinomzellen nachweisen, dass die nur Expression von FL Lef-1 zu einer gesteigerten Expression von c-Myc und Cyclin D1 führt, was Folge einer gesteigerten Aktivität beider Zielgenpromotoren ist. In DNA pull-down Experimenten kann nachgewiesen werden, dass beide Splicevarianten abhängig von β-Catenin an die Konsensussequenz des c-Myc Promoters binden. Jedoch nur im Fall von FL Lef-1 kommt es zu einer Rekrutierung der Histondeacetylase p300 an die DNA was mit einer vermehrten Promoteraktivität und mRNA Synthese einhergeht.
Im Gegensatz zur FL Lef-1 führt nur die Expression von Lef-1 ΔExon VI zu einer Repression der Expression von E-Cadherin, was Folge einer verminderten Aktivität des E-Cadherinpromoters ist. In ChiP Experimenten kann gezeigt werden, dass nur Lef-1 ΔExon VI an den E-Caherinpromoter bindet. Dabei ist die Interaktion von Lef-1 ΔExon VI mit E-Boxen des E-Cadhein unabhängig von der Interaktion mit β-Catenin. Interessanterweise führt jedoch eine Inhibition von TGF-β zu einer Verminderung der Repression des E-Cadherinpromoters durch Lef-1 ΔExon VI.
Die reduzierte Expression von E-Cadherin nach Überexpression von Lef-1 ΔExonVI in Pankreaskarzinomzellen geht mit einer von E-Cadherin abhängigen, verminderten zellulären Aggregation sowie nachfolgend gesteigerten Zellmigration und Invasion einher. Die vermehrte Expression von FL Lef-1 führt im Gegensatz dazu zu einer vermehrten Proliferation der Pankreaskarzinomzellen.
Schlussfolgerung: Mit der vorliegenden Arbeit kann gezeigt werden, dass durch die differentielle Regulation von Lef-1 Splicevarianten in Kooperation mit verschiedenen Signalwegen unterschiedlicher zelluläre Funktionen im Pankreaskarzinom vermittelt werden können.