Z Gastroenterol 2009; 47 - P338
DOI: 10.1055/s-0029-1241586

Elimination Hepatitis B Virus (HBV)-infizierter Hepatozyten durch CD95-mediierte Apoptose

N Joschko 1, A Rademacher 1, A Langhein 1, LA Sun 1, AF Koch 1, W Stremmel 1, M Müller 1
  • 1Universitätsklinikum Heidelberg, Innere Medizin IV, Heidelberg, Germany

Einleitung: Wir konnten bisher zeigen, dass eine HBV-Infektion Apoptose-Signalwege von primären humanen Hepatozyten (PHH) und Hepatomzellen beeinflusst. HBV und das Tumorsuppressorgen p53 kooperieren in der Transaktivierung des CD95 Gens. Dies führt zu einer Hochregulation des CD95 Rezeptors und zu einer Sensitivierung gegenüber CD95-mediierter Apoptose. Dies legt nahe, dass die Elimination HBV-positiver Leberzellen durch Apoptose erfolgt, die durch das CD95 System ausgelöst wird. Wir haben dies in der Kokultur HBV-infizierter Hepatozyten mit CD95 Liganden-exprimierenden Lymphozyten untersucht.

Ziel: Charakterisierung der CD95-vermittelten Apoptose von HBV-infizierten Leberzellen durch CD95 Liganden-exprimierende Lymphozyten.

Methodik: Replikationsfähige HBV-Konstrukte wurden mittels adenoviraler Vektoren in Hepatozyten (Hepatoblastomzellen (HepG2), Hepatokarzinomzellen (Hep3B) und primäre humane Hepatozyten (PHH)) transferiert. HBV-infizierte Hepatozyten wurden mit den Überständen CD95 Ligand (CD95L)-exprimierender Lymphozyten (J16 und KFL-9) für 48h inkubiert. Während KFL-9 Lymphomvorläuferzellen den CD95 Liganden konstitutiv exprimieren, wurden J16 Zellen mit PMA und Ionomycin zur CD95 Liganden-Expression angeregt. Der Apoptosenachweis erfolgte durch FACS-Analysen (Nicoletti Färbung).

Ergebnisse: Die Behandlung von HBV-infizierten Hepatozyten mit den Überständen CD95 Ligand- exprimierender Lymphozyten führte zur Induktion von Apoptose. Bis zu 60% der infizierten Hepatozyten zeigten nach der Inkubation mit den Überständen CD95 Liganden-exprimierender Lymphozyten eine positive Apoptose-Detektion. Während Hep3B Zellen sensitiver gegenüber CD95L waren, der von J16 Zellen exprimiert wurde, zeigten HepG2 Zellen sowie PHHs eine höhere Apoptoserate nach Inkubation mit CD95L von KFL-9 Zellen.

Schlussfolgerung: Unsere Daten zeigen, dass die Elimination von HBV-infizierten Leberzellen durch Apoptose erfolgt, für die das CD95-Rezeptor-Liganden System essentiell ist.