Z Gastroenterol 2009; 47 - P392
DOI: 10.1055/s-0029-1241637

p73-induzierte Apoptose als alternativer Wirkmechanismus von Chemotherapeutika beim Pankreaskarzinom mit inaktiviertem p53 Signalweg

K Gebhard 1, EM Melcher 1, AF Koch 1, K Lorenz 1, W Stremmel 1, M Müller 1
  • 1Universitätsklinikum Heidelberg, Innere Medizin IV, Heidelberg, Germany

Einleitung: Inaktives p53 ist assoziiert mit Tumorgenese und Therapieresistenz von Tumoren. Im Maus-Modell konnte gezeigt werden, dass eine Restauration des Wildtyp p53 Status (wt p53) über Seneszenz oder Apoptoseinduktion zu einer Tumorreduktion führt (Ventura et al., 2007; Xue et al., 2007). Neue Therapiestrategien zur Restauration des wt p53 Status werden derzeit erprobt. Wir konnten bisher zeigen, dass auch p63 und p73 die zentralen Apoptose-Signalwege induzieren.

Ziele: Analyse der molekularen Signalwege, die durch Zytostatika beim Pankreaskarzinom in Abhängigkeit vom p53 Mutationsstatus induziert werden.

Methodik: BxPC-3- Zellen (p53 Mutation) und Colo357- Zellen (p53 wt) wurden mit den Chemotherapeutika 5-Fluoruracil, Gemcitabin und Oxaliplatin behandelt. Die Charakterisierung des Einflusses dieser Chemotherapeutika auf die Apoptosesignalwege der Tumorzellen erfolgte durch FACS-Analyse von Todesrezeptoren (CD95, TNF-R1, TRAIL-R1, TRAIL-R2), Messungen von mitochondrialem Membranpotential und Bax- Protein, sowie durch Blockade- und Stimulationsexperimente (Todesrezeptoren, Caspasen) und Immunoblot (p53 und p73 Proteinexpression).

Ergebnisse: Zytostatika in klinisch relevanten Konzentrationen führen in Pankreaskarzinomzelllinien mit mutiertem p53 zu einer Akkumulation von p73 mit konsekutiver, zeit- und dosisabhängiger Apoptoseinduktion. Wir haben die zugrunde liegenden Mechanismen charakterisiert:

  • Aktivierung des extrinsischen Apotosesignalweges über die Todesrezeptoren CD95, TNF-R1, TRAIL-R1 und -R2 (FACS-Analyse).

  • Aktivierung von Caspasen (Aktivierungs- und Inhibierungs-Assays) und

  • Induktion des intrinsischen Apoptosesignalweges durch Depolarisation der Mitochondrienmembran und Induktion des proapoptotischen Bax-Proteins (FACS-Analyse).

Schlussfolgerung: Unsere Daten etablieren mit der Aktivierung p73-abhängiger Apoptosesignalwege einen alternativen Mechanismus der Apoptoseinduktion in Pankeaskarzinomzelllinien mit mutiertem p53. p73 ist somit eine relevante pharmakologische Zielstruktur, insbesondere in der Therapie von Pankreastumoren mit inaktiviertem p53.