Z Gastroenterol 2009; 47 - P407
DOI: 10.1055/s-0029-1241652

DeltaNp63α ist ein Inhibitor der p53-vemittelten Apoptose und induziert Chemoresistenz beim hepatozellulären Karzinom

H Mundt 1, A Rademacher 1, AF Koch 1, K Lorenz 1, P Hill 1, W Stremmel 1, M Müller 1
  • 1Universitätsklinikum Heidelberg, Innere Medizin IV, Heidelberg, Germany

Einleitung: Wir haben für das hepatozelluläre Karzinom (HCC) gezeigt, dass die Interaktion der p53 Familie (p53, TAp63, TAp73) und ihrer dominant negativen Formen (DeltaN-) über Tumorentstehung, Tumorprogression und Therapieansprechen entscheidet. Die Expression von DeltaNp73 beim HCC bedingt Apoptosehemmung, Chemoresistenz und eine ungünstige Prognose. Die Rolle von DeltaNp63 beim HCC ist bisher nicht untersucht.

Ziele: Wir haben die molekularen Mechanismen der DeltaNp63-Wirkung auf HCC Zelllinien und deren Chemosensitivität charakterisiert.

Methodik: TAp53, TAp63, TAp73 und DeltaNp63 wurden mittels adenoviraler Vektoren (rAdTAp53, rAdTAp63, rAdTAp73 und rAdDeltaNp63) in Hep3B-Zellen (p53 -/-) transferiert. Apoptose wurde in Ergänzung zum Transfer von rAdTAp53, rAdTAp63 und rAdTAp73 durch verschiedene Stimuli (z.B. Chemotherapeutika) ausgelöst und die Interferenz von DeltaNp63 mit den induzierten Apoptose-Signalwegen untersucht. Die Charakterisierung des Einflusses von DeltaNp63 auf die Apoptose-Signalwege erfolgte durch FACS-Analysen (Nicoletti-Färbung, CD95-R, TNF-R, TRAIL-R1, TRAIL-R2 und mitochondriales Membranpotential), Blockade- und Stimulationsexperimente (Todesrezeptoren, Caspasen), Immunoblot, RNA-Interferenz, Luciferase-Reporter-Assays sowie mittels cDNA-Mikroarray-Analysen.

Ergebnis:

  • DeltaNp63 hemmt die rAdTAp53-, rAdTAp63- und rAdTAp73-vermittelte Apoptose.

  • DeltaNp63 inhibiert die durch die Zytostatika Doxorubicin und Mitoxantron induzierte Apoptose.

  • DeltaNp63 reprimiert die Expression des CD95 Gens.

  • DeltaNp63 hemmt die Aktivierung des bax Gens und die Expression des pro-apoptotischen Bax.

  • DeltaNp63 stabilisiert das mitochondriale Membranpotential.

Schlussfolgerung: DeltaNp63 inhibiert die zentralen Apoptose-Signalwege: den extrinsischen über Todesrezeptoren vermittelten sowie den mitochondrialen Apoptose-Signalweg. Hierdurch wird Chemoresistenz beim HCC induziert. Die Hemmung der DeltaNp63 Wirkung oder die Beeinflussung des Gleichgewichts von TAp63 und DeltaNp63, könnte eine neue Therapieoption für das HCC eröffnen.