Immuntherapie des Pankreaskarzinoms mit immunstimulatorischer siRNA: Kombination von „gene silencing“ von TGF-beta mit RIG-I-vermittelter Immunaktivierung

Das Pankreaskarzinom zeichnet sich durch eine ausgeprägte Immunsuppression aus. Ein immunsuppressiver Faktor, der mit einer ungünstigen klinischen Prognose korreliert, ist das Zytokin TGF-beta. Erhöhte TGF-beta Serumspiegel finden sich nicht nur bei Patienten mit Pankreaskarzinom, sondern auch im murinen Panc02 Pankreaskarzinommodell, weshalb uns dieses Modell als geeignet erscheint, Strategien zur Aufhebung der Immunsuppression durch TGF-beta zu entwickeln. Hier beschreiben wir eine systemische Therapie von Mäusen mit hochaggressiven Panc02 Pankreastumoren (subkutan, orthotop) mit einer gegen TGF-beta gerichteten siRNA. Neben „klassischer“ siRNA wurde mittels in vitro Transkription eine 5'-Triphosphat-siRNA gegen TGF-beta generiert, die „gene silicing“ durch RNA-Interferenz mit einer potenten Immunaktivierung vereint. Die Immunaktivierung erfolgt durch die 5'-Triphosphat-Modifikation der siRNA, was zu einer Aktivierung der zytosolischen Helikase RIG-I führt. RIG-I induziert eine Signalkaskade, die das Immunsystem zur Abwehr von Viren benutzt. Dies führt letztlich zur Aktivierung zytotoxischer T-Zellen, die die Aufgabe haben, „virusinfizierte“ Zellen zu eliminieren. Die 5′-Triphosphat-siRNA gegen TGF-beta führte neben einer Hemmung der TGF-beta Produktion zu einer Hochregulation der MHC-I-Expression und Induktion von Typ-1-Interferon in den Tumorzellen. Zudem wurde eine Caspase 9-abhängige Apoptose der Tumorzellen induziert. Ähnliche Ergebnisse erhielten wir für humane Pankreaskarzinomzelllinien. In vivo führte die 5'-Triphosphat-siRNA zu einer Th1-gerichteten Immunantwort mit Induktion von TNF, IL-12, IFN und IP-10. Aus der Therapie resultierten ein verlangsamtes Tumorwachstum und signifikant verlängertes Überleben von Mäusen mit Panc02-Pankreastumoren. Mit unserer Arbeit stellen wir ein innovatives Konzept der Immuntherapie des Pankreaskarzinoms mit hochaktiver immunstimulatorischer siRNA vor.