Z Gastroenterol 2010; 48 - G5
DOI: 10.1055/s-0030-1267704

TROY als β-Catenin-Zielgen im kolorektalen Karzinom

S Schön 1, A Herbst 1, A Ofner 1, S Thieme 2, H Blum 2, FT Kolligs 1
  • 1Klinikum der Universität München-Campus Großhadern, Medizinische Klinik II, München,Germany
  • 2Universität München, Genzentrum, München, Germany

Einleitung: Durch Inaktivierung des Tumorsuppressorgens Adenomatous Polyposis Coli (APC) kommt es in der Mehrzahl der kolorektalen Karzinome zu einer Deregulation des Transkriptionsfaktors β-Catenin, der die Expression einer Vielzahl von Genen reguliert. Welche Bedeutung einzelne Zielgene für die Entstehung kolorektaler Karzinome haben ist noch nicht ausreichend untersucht worden.

Ziele: Identifikation von β-Catenin-Zielgenen und sowie deren Charakterisierung im Hinblick auf Expression, Regulation und Funktion, um ihre Bedeutung für die kolorektale Karzinogenese besser zu verstehen.

Methodik: Transfektion von Kolonkarzinomzelllinien mit β-Catenin siRNA und Identifizierung von β-Catenin-Zielgenen im DNA-Mikroarray. Validierung potenzieller Zielgene mittels quantitativer RT-PCR. Messung der TROY-Expression in Kolonkarzinomzelllinien und Tumorgewebe mittels quantitativer RT-PCR. In Reportergenassays wurden TROY-Promoterregionen auf eine β-Catenin-abhängige Regulation untersucht. Mit einem NF-κB-Reportergen wurde eine TROY-abhängige Aktivierung von NF-κB analysiert.

Ergebnisse: In DNA-Mikroarrays zeigte sich eine β-Catenin-abhängige Regulation von 107 Genen um mindestens den Faktor 2. Das Molekül TROY wurde aufgrund seiner Zugehörigkeit zur TNF-Rezeptor-Superfamilie und wegen der starken Regulation (Faktor 3,4) für weitere Untersuchungen ausgewählt. Die Validierung der β-Catenin-abhängigen Expression von TROY erfolgte mittels quantitativer RT-PCR. Wir fanden eine signifikant erhöhte TROY-Expression in der Mehrzahl der primären Kolonkarzinome und Kolonkarzinomzelllinien. Im TROY-Gen wurden Bereiche identifiziert, die für eine transkriptionelle Regulation durch β-Catenin notwendig sind. Eine Aktivierung des NF-κB-Signalweg durch TROY konnte gezeigt werden.

Schlussfolgerung: Das Rezeptormolekül TROY wurde als ein Zielgen von β-Catenin im kolorektalen Karzinom identifiziert. Die Regulation der TROY-Expression erfolgt dabei direkt durch β-Catenin. TROY reguliert die Aktivität von NF-κB und stellt damit eine Verbindung zwischen dem β-Catenin- und NF-κB-Signalweg her.