Z Gastroenterol 2012; 50 - P2_25
DOI: 10.1055/s-0031-1295822

CAR-vermittelte Induktion des Indy-Gens in primären Rattenhepatozyten

C Ploschenz 1, M Kuna 1, F Neuschäfer-Rube 1, A Pathe-Neuschäfer-Rube 1, GP Püschel 1
  • 1Institut für Ernährungswissenschaft, Universität Potsdam, Nuthetal

Kalorische Restriktion verbessert die Gesundheit und verlängert die Lebensspanne über nahezu alle Speziesgrenzen hinweg. Daneben können auch Funktionsänderungen von Genen wie z.B. dem Indy („I am not dead-yet“)-Gen die kalorische Restriktion simulieren und die Lebenserwartung erhöhen. Das in Drosophila melanogaster entdeckte Indy-Gen codiert einen Tricarboxylattransporter, der Intermediate des Citrat-Zyklus in Zellen transportiert. Diese können zur Energieversorgung des Organismus genutzt werden. Über die Regulation des Indy-Gens ist noch wenig bekannt. In Rattenhepatozyten wurde die Indy-Expression durch das Hungerhormon Glucagon induziert. Im Fastenzustand werden noch weitere Gene hochreguliert, wie z.B die Transkriptionsfaktoren PPARalpha und CAR, welche unter anderem weitere Gene kontrollieren, die einen Rolle im Energiestoffwechsel haben. Es sollte daher der mögliche Einfluss von CAR und PPARalpha auf die Regulation des Indy-Gens in Rattenhepatozyten untersucht werden. Dazu wurden Rattenhepatozyten mit dem CAR-Aktivator Phenobarbital und dem PPARalpha-Agonisten WY14643 stimuliert und anschließend die Indy-mRNA sowohl die Indy-Promotoraktivität untersucht. Phenobarbital (PB) induzierte die Indy-mRNA Expression in Rattenhepatozyten leicht, WY14643 hatten keinen Einfluss auf die Indy-mRNA, steigerte aber die PB-vermittelte Indy-mRNA Induktion ähnlich wie die der Cyp2B1-mRNA, einem prototypischen CAR-Zielgen. Indy konnte demnach als potentielles CAR-Zielgen identifiziert werden. Im Gegensatz zur Indy-mRNA wurde die Promotoraktivität der getesteten Firefly-Luciferase Reportergenkonstrukte Indy-prom –290, –324 und –804 weder durch PB noch durch WY14643 beeinflusst. Dies lässt den Rückschluss zu, dass die für die CAR-abhängige Induktion der Indy-mRNA verantwortlichen Elemente in den getesteten Promotorfragmenten nicht enthalten waren.