Inhibierung des Komplementfaktors C5a mittels Spiegelmeren im Mausmodell der Laser-induzierten choroidalen Neovaskularisation

Hintergrund: Das Komplementsystem ist maßgeblich in die Pathogenese neovaskulärer Netzhauterkrankungen involviert. Ziel dieser Studie war es den Einfluss der direkten Inhibierung des Komplementfaktors C5a durch das C5a-bindende Spiegelmer NOX-D20 auf die choroidale Neovaskularisation (CNV) am Mausmodell zu untersuchen.

Methoden: Bei adulten C57BL/6N Wildtyp-Mäusen wurde mittels standardisierter Laserbehandlung eine CNV induziert. Anschließend wurde den Tieren in 3 Gruppen NOX-D20 in den Konzentrationen 0,3 mg/ml, 3,0 mg/ml und 30 mg/ml intravitreal injiziert. Eine vierte Gruppe diente als Kontrolle und erhielt eine Vehikel-Lösung. Die Auswertung erfolgte mittels in-vivo Fluoreszenzangiografie (FAG) sowie postmortal durch immunhistochemische Färbungen auf Paraffinschnitten und choroidalen Flachpräparaten. In je 10 Augen pro Gruppe wurde die Leckage-Intensität bestimmt sowie die CNV-Fläche vermessen und anschließend statistisch mit der Kontrollgruppe verglichen.

Ergebnisse: In der Gruppe mit einer Konzentration von 0,3 mg/ml zeigten sich keine signifikanten Unterschiede der Leckage-Intensität und der CNV-Fläche (p = 0,547; p = 0,246). Behandelte Augen, die NOX-D20 in einer Konzentration von 3,0 mg/ml erhielten, zeigten sowohl eine signifikant reduzierte Leckage-Intensität als auch CNV-Fläche im Vergleich zur Kontrollgruppe (p = 0,005; p = 0,020). Im Mittel konnte die CNV-Fläche gegenüber der Vehikel-Gruppe um 50% verkleinert werden. Bei einer Konzentration von 30 mg/ml setzte sich dieser Trend der Leckage-Intensität und der CNV-Fläche fort, jedoch zeigten sich hier keine signifikanten Unterschiede (p = 0,126; p = 0,145). In einer zusätzlichen Untersuchung auf Zytotoxizität mittels TUNEL (TdT-mediated dUTP-biotin nick end labeling) und GFAP (Glial fibrillary acidic protein) konnte in allen verwendeten Konzentrationsstufen des NOX-D20 weder eine erhöhte Apoptoserate noch eine vermehrte Gliafaserproliferation als Ausdruck einer substanzbedingten Schädigung der Netzhaut beobachtet werden.

Schlussfolgerungen: Im Mausmodell ließ sich die Leckage und CNV-Fläche mittels spezifischer Inhibierung des Komplementfaktors C5a signifikant reduzieren. Der intravitreale Einsatz von Spiegelmeren in den getesteten Konzentrationen zeigte in unseren Versuchsreihen keine Zytotoxizität. Damit scheint der intravitreale Einsatz des C5a-Komplementinhibitors NOX-D20 im Mausmodell ein potentielles Therapeutikum zur Behandlung choroidaler Neovaskularisationen darzustellen.