Einleitung: Endotoxin-Messungen aus biologischem Material sind in der Erforschung von Lebererkrankungen
von unmittelbarem Interesse. Ein weitverbreitetes Testverfahren ist der Limulus Amoebocyte
Lysat (LAL) Assay. Dieser Test findet hauptsächlich im Vermessen von wässrigen Lösungen
Verwendung und ist daher für Serumproben nur eingeschränkt anwendbar. Eine Alternative
ist ein Zell-basiertes Detektionssystem, wobei die Zelllinie HEK-293 mit einer TLR4-Reporterkassette
versehen wird. Wir haben beide Systeme verglichen und hinsichtlich ihrer Anwendbarkeit
an Serumproben von Zirrhosepatienten getestet.
Methoden: Die Tests im Vergleich waren der Endochrome-K™ Kit von Charles River Laboratories
und der HEK-Blue™ LPS Detection Kit von Invivogen (mit adaptiertem Protokoll). Zum
Überprüfen der Wiederfindungsrate wurde Serum von sieben gesunden Personen mit Endotoxin
versehen (12,5 bzw. 6,25 EU/ml) und mit beiden Testverfahren vermessen. In einem zweiten
Schritt wurde die Anwendbarkeit an Serumproben von 75 Zirrhosepatienten überprüft.
Ergebnisse: Die Wiederfindungsrate des Zell-basierten HEK-Blue™ LPS Detection Kits lag bei 99,2
(± 54,1) %. Die Wiederfindungsrate des Endochrome-K™ Kits lag für Serumproben bei
0,16 (± 0,09) % und für wässrige Lösungen bei 101,1 (± 18,3) %. In weiterer Folge
konnte mit dem Endochrome-K™ Kit nur in 18 von 75 Patientenproben (24%) Endotoxin
nachgewiesen werden (0,144 – 0,005 EU/ml). Mit dem HEK-Blue™ LPS Detection Kit waren
53 von 75 Proben (71%) Endotoxin-positiv (3,6 – 58,9 EU/ml).
Conclusio: Aufgrund der ausschlaggebenden Rolle von Endotoxin in der Entwicklung und Progression
der Leberzirrhose, hat die adäquate Messung einen besonderen Stellenwert in der Hepatologie.
Aus den vorliegenden Daten schließen wir, dass ein Zell-basiertes System wie der HEK-Blue™
LPS Detection Kit die tatsächliche Endotoxinkonzentration in Serumproben zuverlässiger
wiedergibt als ein LAL-Assay. Der getestete LAL-Assay neigt dazu, die Endotoxinkonzentration
zu unterschätzen und führt somit zu falschen Schlussfolgerungen.
