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DOI: 10.1055/s-0037-1600350
Time lapse MRT: Single cell tracking in der experimentellen autoimmunen Enzephalomyelitis
Publication History
Publication Date:
23 March 2017 (online)
Zielsetzung:
Time lapse MRT ist eine innovative Technologie mit erheblichem Potential für cell tracking Studien. Über die repetitive Bildakquisition soll nicht nur ein einzeitiger, statischer Bildeindruck, sondern eine dynamische Abbildung markierter Leukozyten ermöglicht werden. Ziel dieser Studie war die Optimierung der zeitlichen Auflösung von time lapse MRT zur Anwendung in einem Modell muriner autoimmuner Enzephalomyelitis (EAE).
Material und Methodik:
Die Induktion der EAE erfolgte in C57BL/6J Mäusen via i.v. Injektion des Myelin Oligodendrozyten Glykoproteins. Eisenoxid Nanopartikel (Resovist®, 1,3 ml pro kg/KG) wurden 24h vor der MRT-Untersuchung des Gehirns intravenös injiziert. Diese wurde an einem 9,4T Kleintier-MRT bei EAE Mäusen in unterschiedlichen Krankheitsstadien (symptomatisch n = 8, präsymptomatisch n = 2) bzw. gesunden Kontrolltieren (n = 3) mit einer T2* Multigradienten-Echo Sequenz und folgenden Parametern durchgeführt: TR: 649 ms, TE: 8.0 ms, FA: 60 °, Mittelungen: 4, Schichten: 38, Schichtdicke: 300 µm, zeitliche Auflösung: 8 min 12 s (einzelner time frame) bzw. 2h 44 min bei 20 time frames. Nach der MRT Untersuchung wurden die Mäuse geopfert und das Gehirn histologisch mittels der Berliner-Blau Eisenfärbung und der Mac-3 Makrophagenfärbung aufbereitet. Die MR-Datensätze wurden in Bezug auf die Detektion hypointenser Spots (Events) manuell ausgewertet.
Ergebnisse:
Die zeitliche Auflösung von time lapse MRT betrug für eine vollständige Akquisition des Gehirns 8 min pro time frame. Die Technik ermöglichte die Verfolgung zirkulierender, mit Eisenpartikeln beladener Leukozyten in gesunden Tieren sowie Tieren mit EAE. Die Anzahl detektierter Events zeigte eine signifikante Veränderung zwischen EAE- und Kontrolltieren.
Schlussfolgerungen:
Time lapse MRT ermöglicht single cell tracking im Tiermodell. Am Beispiel der EAE konnte die Möglichkeit zur Detektion einer veränderten Immunzelldynamik bei inflammatorischen Erkrankungen aufgezeigt werden.