Neben der Ausbeute an markierten Erythrozyten stellt die Reinheit der injektionsfertigen
Erythrozytensuspension von nicht erythrozytengebundener Aktivität (dem NE51Cr) ein wesentliches Gütekriterium der 51Cr-Markierung dar. Nach Darstellung einer besonders präzisen Methode zur Messung des
NE51Cr werden nicht nur die wesentlichen Einflußgrößen auf das NE51Cr untersucht, sondern das NE51Cr verschiedenen Verfahren der Komponententrennung unterzogen. Als Antikoagulans wurde
ACD verwendet. Die Resultate zeigen, daß die Chromat-Ionen nach sehr kurzer Zeit (max.
2,5 Min.) praktisch komplett in die Erythrozyten diffundiert sind. Die Inkubationszeit
(IKZ: Zeit des Kontaktes von Erythrozyten und 51Cr) ist von wesentlichem Einfluß auf die Bildung von geladenen und/oder neutralen
Chrom(III)- Citrat-Komplexen, die teilweise in die Erythrozyten diffundieren und in
den Erythrozyten das Chrom-Ion an andere Bindungspartner verlieren. Die ionenaustauschbaren
anionischen Chrom-Citrat-Komplexe überwiegen bei weitem gegenüber neutralen und möglicherweise
bestehenden kationischen Komplexen. Ihr Anteil nimmt mit wachsender IKZ zu. Nur etwa
die Hälfte der Komplexe liegt in (überwiegend lockerer) Proteinbindung vor, nur ein
geringer Teil der Aktivität kann durch äthanol gefällt werden. Unter den Standardbedingungen
des Signette-Schnellverfahrens mit Anionenaustauscherreinigung (IKZ: 10 Min.) finden
sich NE51Cr-Werte von ca. 2,5%. Die Auswirkung von abweichenden Bedingungen können einem Nomogramm
entnommen werden. Reduzierenden Substanzen im Blut kommt unter extremen Bedingungen
eine gewisse Bedeutung zu, z. B. beträgt das NE51Cr 30 Min. nach 2,5 g L-Ascorbinsäure i.v. 5%. Das in-vivo-Verhalten zeigt für 2/3
dieser Aktivität eine Halbwertszeit von mehr als 24 Std.
Beside the yield of labeled erythrocytes the purity of the suspension of erythrocytes
ready for injection from nonerythrocyte activity (NE51Cr) is an important criterion for the quality of the 51Cr-labeling method. After presentation of an especially precise method for measuring
the NE51Cr the parameters influencing the NE51Cr in the main were investigated and the NE51Cr was analysed using different methods of separation of its components. ACD was used
as anticoagulant. The results demonstrate that chromate-ions diffuse into the erythrocyte
nearly completely in a very short time (max. 2.5 min). The incubation time (ICT: Time
of the contact of erythrocyte and 51Cr) has an important influence in forming charged and/or neutral chromium (Ill)-citrate-complexes,
which diffuse in part into the erythrocyte and lose the chromium ion inside the erythrocyte
to other binding partners. The ion exchangeable anionic chromium-citrate-complexes
preponderate in main against neutral and possibly existing cationic complexes. This
part increases with increasing ICT. Only about the half of the complexes is protein
bound (loosely in main), only a minimal part of the activity can be precipitated by
ethanol. Using standard conditions in the Signette-method for rapidly 51Cr-labeling of erythrocytes with purification by an anionexchanger (ICT: 10 min) the
NE51Cr is about 2.5%. The influence of varied conditions can be read from a nomogram.
Reducing agents in the blood have some importance in extreme conditions, e. g. after
2.5 g L- ascorbic acid the NE51Cr is 5%. The in-vivo time course of two thirds of this activity shows a half time
of more than 24 hours.
