Glyceraldehyd-3-Phosphat Dehydrogenase (GAPDH) als mögliches Kandidatengen bei der Pathogenese von Zystadenolymphomen der Glandula Parotis

Einleitung:

Zystadenolymphome (ZALs) stellen die zweithäufigsten gutartigen Tumoren der Glandula Parotis dar wobei ihre Pathogenese unklar ist. Sie bestehen aus, in einem lymphozytären Stroma eingebetteten, Onkozyten, welche zahlreiche gealterte Mitochondrien aufweisen. In Voruntersuchungen beobachteten wir Unterschiede in der Expression von GAPDH bei Onkozyten.

Methoden:

3 oder 6 µm dicke in Formalin-fixierte und Paraffin eingebettete (FFPE) ZAL und Glandula Parotis Gewebeschnitte wurden auf reguläre oder spezielle für die Lasermikrodissektion (LMD) entwickelte (MembraneSlides, Zeiss) Objektträger aufgetragen und mit Hämatoxylin und Eosin (HE) gefärbt. Eine digitale Bildanalyse (ImageJ/Fiji) wurde nach immunhistochemischer Färbung mit einem gegen GAPDH gerichteten Antikörper durchgeführt (Kontrolle = IgG). Die LMD erfolgte mit einem PALM® MicroBeam Mikroskop (Zeiss). Gesamt-RNA wurde mittels des RNeasy FFPE kit (Qiagen) isoliert und GAPDH mRNA Transkripte mittels qPCR quantifiziert.

Ergebnisse:

ZAL Onkozyten zeigten ein heterogenes, geschecktes GAPDH Expressionsmuster in der Immunhistochemie. Eine durchgeführte digitale Bildanalyse ergab ein signifikant niedrigeres (p < 0,005) GAPDH Signal in Onkozyten verglichen mit normalen duktalen Zellen der Glandula Parotis. qPCR an RNA, welche aus LMD-isolierten Zellen gewonnen wurde, zeigte im Durchschnitt weniger GAPDH mRNA Transkripte in Onkozyten verglichen mit normalen duktalen Zellen, wobei dies teilweise Signifikanzniveau erreichte (p = 0,0441).

Schlussfolgerungen:

Da berichtet wurde, dass GAPDH für die zelluläre Mitophagy essentiell ist, könnte der Verlust von GAPDH in ZAL Onkozyten bei der Akkumulation alter Mitochondrien und der Entstehung von ZALs eine Rolle spielen.

Publication History

Publication Date:
18 April 2018 (online)