Nachweis von epigenetischen Krebsmarkern in Speichelproben zur Detektion von Kopf-Hals-Tumoren mittels quantitativer real-time-Multiplex-PCR

Einleitung Kopf-Hals-Plattenepithelkarzinomen (HNSCC) werden meist in fortgeschrittenen Stadien diagnostiziert, da die Symptome erst spät auftreten. Anhand von primärem Tumorgewebe entwickelten wir DNA-Methylierungsmarker zum zeitigen Nachweis von HNSCC. Unsere aktuelle Machbarkeitsstudie soll zeigen, dass die Detektion der Marker auch in nicht-invasiven Proben möglich ist.

Methode Für die Validierung der Marker Z1 - Z5 (Referenz ACTB) wurden Gefrierschnitte von 20 HNSCC und 20 Kontrollen verwendet. Für den methylierungsspezifischen Multiplex-Assay (cobas z 480 analyzer, Roche) wird die DNA isoliert und anschließend chemisch behandelt. Ziel der Studie ist der Einsatz von DNA aus jeweils 200 Gewebe- und Speichelproben im Multiplex-Assay. Die Probensammlung erfolgt an der Klinik für HNO-Heilkunde, Universitätsklinikum Jena.

Ergebnisse Im Validierungsprobenset (HNSCC- und Kontrollgewebe) zeigten die Marker Z1 - Z5 eine 100 %ige klinische Sensitivität und 95 %ige Spezifität (1/5 Markern positiv detektiert). Die Sensitivität der Einzelmarker lag zwischen 30 % - 70 %, mit mindestens 95 %iger Spezifität. Alle Gewebeproben der ersten 6 HNSCC-Patienten der Studie waren positiv für die Marker Z1, Z3-Z5. Z1 zeigte übereinstimmende Ergebnisse mit allen sechs Speichelproben, Z5 mit 5 aus 6 Speichelproben. Die Detektionsraten von Z2 und Z4 waren bisher schwach in den Speichelproben. Ergebnisse aus der Kontrollgruppe liegen noch nicht vor.

Schlussfolgerung Die vorläufigen Ergebnisse aus der Validierung und den aktuellen Patientenproben stützen unsere Hypothese, HNSCC-Marker sowohl im Gewebe als auch im Speichel robust nachzuweisen. Die Verwendung von Speichel für krebsspezifische Diagnosetests auf der Grundlage epigenetischer Marker kann für die sekundäre und tertiäre Prävention von Nutzen sein

Publication History

Article published online:
10 June 2020