Direkte Kombination von Lichtblattfluores-zenzmikroskopie (LSFM) und bildgebender Massenspektrometrie (IMS) optisch geklärter Gewebeproben

Einleitung Die LSFM wird zur 3D-Analyse optisch geklärter Gewebeproben verwendet. Mit MALDI-IMS können Abundanz und räumliche Verteilung verschiedener Analyte in histologischen Schnitten detektiert werden.

Material und Methoden Hirngewebeproben von Mensch (FFPE-Archivmaterial) und Maus (formalinfreie Gewebefixierung) wurden optisch geklärt (3DISCO) und mit LSFM untersucht. Anschließend wurden aus exzidierten Proben des geklärten Gewebes Paraffinschnitte erstellt und mit MALDI-IMS analysiert.

Befunde Massenspektren von > 50 Protein (Mausproben) und > 400 tryptischen Peptiden (humane Proben) wurden detektiert. Die entsprechenden MALDI-IMS-Abbildungen konnten in die 3D-LSFM-Rekonstruktionen der Proben integriert werden.

Schlussfolgerung Die direkte Kombinierbarkeit von LSFM und MALDI-IMS gestattet IMS-Proteinanalysen an Gewebeschnitten mit individuell gezielt definierter 3D-Orientierung.

Publication History

Article published online:
08 July 2020