Einsatz der Mehrparameter-Durchflußzytometrie zur automatischen Identifizierung maligner Blasentumorzellen

Zusammenfassung

Trotz vielfältiger Verbesserungen durch-flußzytometrischer DNS-Bestimmungen zum Nachweis von Harnblasentumoren sind aufgrund der häufig fehlenden Aneuploidie die derzeitigen Identifizierungsraten als Grundlage für klinische Entscheidungen noch nicht ausreichend. Ziel vorliegender Untersuchungen an 162 Zellproben von Patienten mit histologisch gesichertem Harnblasenkarzinom und 156 Proben von Kontrollpersonen war es deshalb, durch gleichzeitige Messung von zytoplasmatischem pH-Wert und intrazellulärer Esteraseaktivität bzw. durch zusätzliche Zelldifferenzierung mit Hilfe von monoklonalen Antikörpern bessere Tumoridentifizierungen zu erhalten als mit DNS-Messungen alleine.

36 % aller Karzinome konnten alleine aufgrund ihres aneuploiden DNS-Verteilungsmusters eindeutig als maligne identifiziert werden. Durch eine Kombination von Aneuploidie und Messung funktioneller Zellparameter konnte eine Sensitivität in der Proben-identifikation von 82 % bei einer Spezifität von 88 % erhalten werden. Durch Bestimmung des Antigenverlustes mit Lewis Blutgruppen-Antikörpern zusätzlich zur DNS-Analyse konnte sogar eine Sensitivität von 91 % erreicht werden. Im Vergleich zu alleinigen DNS-Bestimmungen läßt sich somit durch die Mehrparameter-Durchflußzy-tometrie eine deutliche Verbesserung der Identifizierungsrate von Harnblasentumoren erhalten.

Abstract

Despite improvements in the recognition of DNA aneuploidies by flow cytometry, the present identification rates in bladder cancer are not sufficiently high to serve as a basis for clinical decisions. The aim of this study was to improve sensitivity and specificity of bladder tumor cell detection by a simultaneous measurement of intracellular esterase activity and cytoplasmic pH or antigenic determinants of the cellular surface together with DNA and cell volume.

36 % of the tumor samples were identified by one or more aneuploid peaks in the DNA-distributions. When DNA and esterase activity were jointly evaluated, bladder tumor samples were correctly identified in 82 % of the cases with a specificity of 88 % for normal samples. Up to 91 % of the tumor samples were recognized by evaluation of DNA and Lewis blood-group antigens at a specificity of 88 %.

Compared to sole DNA examination multiparameter analysis increases the identification rate of bladder tumor cells significantly. The combined determination of DNA, functional cell parameters and cell surface antigens on the same cell samples is likely to further increase tumor identification rates. Flow cytometry could then be very valuable as a screening examination for malignant cells in urine samples.

Key-Words

Bladder cancer - Flow cytometry - CEA - Lewis blood-group antibodies