Detektion von Matrix-Metalloproteinasen während der Besiedelung einer dezellularisierten extrazellulären Matrix mit chondrogenen Progenitorzellen – DFG Fördernummer: Ro2207/5 – 1

B Kuhlin; J Kern; D Gvaramia; N Rotter; H Tritschler; Y Jakob; L Körber; R Breiter; RE Brenner

doi:10.1055/s-0039-1686876

Laryngo-Rhino-Otologie, Table of Contents

CC BY-NC-ND 4.0 · Laryngorhinootologie 2019; 98(S 02): S386-S387
DOI: 10.1055/s-0039-1686876

Poster

Tissue Engineering/Stammzellen

Detektion von Matrix-Metalloproteinasen während der Besiedelung einer dezellularisierten extrazellulären Matrix mit chondrogenen Progenitorzellen – DFG Fördernummer: Ro2207/5 – 1

Authors

B Kuhlin

¹HNO Klinik – Universitätsklinikum Mannheim, Mannheim
J Kern

²Klinik f. Hals- Nasen- u. Ohrenheilkunde, Kopf- Halschirurgie, Medizinische Fakultät Mannheim der Universität Heidelberg, Mannheim
D Gvaramia

²Klinik f. Hals- Nasen- u. Ohrenheilkunde, Kopf- Halschirurgie, Medizinische Fakultät Mannheim der Universität Heidelberg, Mannheim
N Rotter

²Klinik f. Hals- Nasen- u. Ohrenheilkunde, Kopf- Halschirurgie, Medizinische Fakultät Mannheim der Universität Heidelberg, Mannheim
H Tritschler

³Klinik für Orthopädie Sektion Biochemie der Gelenks- und Bindegewebserkrankungen – Universitätsklinikum Ulm, Ulm
Y Jakob

²Klinik f. Hals- Nasen- u. Ohrenheilkunde, Kopf- Halschirurgie, Medizinische Fakultät Mannheim der Universität Heidelberg, Mannheim
L Körber

⁴Lehrstuhl für Bioverfahrenstechnik – Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg, Erlangen
R Breiter

⁴Lehrstuhl für Bioverfahrenstechnik – Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg, Erlangen
RE Brenner

³Klinik für Orthopädie Sektion Biochemie der Gelenks- und Bindegewebserkrankungen – Universitätsklinikum Ulm, Ulm

Abstract

Full Text

Einleitung:

Dezellularisierte extrazelluläre Matrix (DECM) aus porcinem Nasenknorpel ist ein vielversprechendes Ersatzmaterial für die Knorpelrekonstruktion. Damit Zellen in die DECM effizient einwandern können benötigen sie extrazelluläre Matrix spaltende Enzyme wie z.B. die Matrix-Metalloproteinasen (MMP). Ziel dieser Arbeit war es festzustellen, ob chondrogene Progenitorzellen (CPC), die auf der DECM ausgebracht wurden, MMPs (aktiv oder inaktiv) sezernierten.

Methoden:

Jeweils 5 unbehandelte sowie 5 behandelte Scaffolds wurden mit CPCs (Pool aus 3 Spendern), isoliert aus humanem Nasenknorpel, besiedelt und für 42 Tage kultiviert. Behandelt wurde die DECM mit einer fallenden Metallkugel, welche Risse erzeugt, um die Invasion von Zellen zu erleichtern. An Tag 5, 26, 33 und 42 wurden in 3 voneinander unabhängigen Versuchsreihen Proben des Zellüberstandes analysiert. Die Konzentrationen der MMPs (-1,-2,-3,-7,-8,-9,-10, -12 und -13) wurden mit Multiplex-Immunoassays gemessen und die Aktivität mit einem Assay auf Fluoreszenzbasis bestimmt.

Ergebnisse:

MMP-8 und MMP-9 waren weder bei den unbehandelten noch bei den behandelten Scaffolds nachweisbar. MMP-12 war nur bei behandelten Scaffolds detektierbar. MMP-7 wurde bei beiden Varianten in gleichen Konzentrationen gefunden. Die anderen MMPs wurden bei beiden Varianten detektiert, aber bei unbehandelter DECM in geringeren Konzentrationen. Der Aktivitätsassay ergab, dass die sezernierten MMPs nur eine geringe Aktivität aufwiesen.

Schlussfolgerungen:

Wir konnten zeigen, dass CPCs, die auf einer DECM ausgebracht werden, MMPs sezernieren, diese aber nicht aktivieren. Insofern haben die MMPs in vitro keinen Einfluss auf die Zellmigration. Die Aktivierung der MMPs in vitro könnte den Einwanderungsprozess positiv beeinflussen.