Enzymatische Bestimmung von Gesamt-Cholesterin im Serum

Zusammenfassung

Der Risikofaktor Cholesterin läßt sich mit der neu entwickelten Test-Combination »Cholesterin, enzymatischer Farbtest« problemlos ohne Einsatz aggressiver Reagentien spezifisch bestimmen. Das ergab eine intensive technische Erprobung. Bei manueller Durchführung wurden für die Präzision von Tag zu Tag Variationskoeffizienten von 2-3% bei Berechnung über Faktor ermittelt (in Serie etwa 2%). Die Empfindlichkeit betrug bei einer Cholesterinkonzentration von 200 mg/dl E = 0,153 (λ =405 nm) bei einem Linearitätsbereich bis 1000 mg/dl. Die Wiederfindung von zugesetzten reinen Cholesterinlösungen betrug 100 ± 1-2%. In quantitativen Studien wurden 53 repräsentative Medikamente, Antikoagulantien und Metaboliten sowohl in Reagensglasversuchen als auch an Patienten geprüft. Die Richtigkeit der Ergebnisse wurde durch keine Substanz gestört (α = 0,05). Die Übereinstimmung mit dem bisher als Referenzmethode eingesetzten Mehrschritt-Extraktionsverfahren (Abell-Kendall) war gegeben (lineare Regression: x-Achse: Extraktionsmethode, y-Achse: enzymatischer Farbtest; y = 0,99x+1,1). Infolge erheblicher systematischer und zufälliger Fehler lieferte die direkte chemische Methode nach Liebermann-Burchard zum Teil stark differierende Resultate.

Summary

Cholesterol can be specifically measured without difficulty and without complex reagents by means of a newly developed enzymatic colour test. Intensive technical evaluation confirmed its accuracy. Manual use gave a day-to-day coefficient of variation of 2-3%; the sensitivity at a cholesterol concentration of 200 mg/dl was E = 0.153 (λ = 405 nm), with a linearity up to 1000 mg/dl. Recovery of added pure cholesterol solution was 100±1.2%. A quantitative study of 53 representative drugs, anticoagulants and metabolites was performed both in test tube and on patients. Accuracy of the result was unaffected by any of the substances (α = 0.05). Comparison with the multi-step extraction method used at present as a reference (Abell-Kendall) gave a regression equation of y = 0.99x + 1.1 (x axis: extraction method; y axis: enzymatic colour test). The direct chemical method after Liebermann and Burchard gave, in part, markedly differing results because of considerable systematic and accidental errors.