CD34+ Zellen sind Progenitor-Zellen für Desmin+ Fibrozyten im Abcb4-/-Maus Modell der sklerosierenden Cholangitis

Einleitung: Der Phosphatidylcholin-Transport über die kanalikuläre Hepatozytenmenbran ist bei Mutationen des humanen ABCB4-Gens eingeschränkt oder, wie im Abcb4 knockout Maus-Modell völlig blockiert. Der Mangel Mizellen-bildender Substanzen in der Galle ist die Ursache für die Entstehung einer progredienten intrahepatischen Cholangitis [1,2]. Das Ziel der vorliegenden Studie war die zelluläre Charakterisierung der Cholangitis-assoziierten Fibrogenese.

Methoden: Leber-Proben von BALB/c-Abcb4 ^-/-, sowie wild-Typ Kontrollen wurden im Alter von 4, 8, 16 und 26 Wochen entnommen und entsprechend der geplanten Analytik konserviert. Die Gen- und Protein-Expression von GFAP, CRP2, Desmin, α-SMA, Kollagen typ I und CD34 wurde mittels quantitativer RT-PCR-Analyse, Western Blot und immunohistologischer Methoden untersucht.

Ergebnisse: Die spezifischen Marker hepatischer Sternzellen sind transkriptionell nicht reguliert, konnten aber immunhistochemisch im Bereich proliferierender Gallengänge identfiziert werden. Die fortschreitende Fibrose wurde durch die Zunahme Desmin-positiver Zellen begleitet. Co-Immunofluoreszenz-Färbungen zeigen CD34⁺/Desmin^- Zellen innerhalb der Portalfelder, die zum Parenchym hin in CD34⁺/Desmin⁺ Zellen übergehen, während im Parenchym nur noch CD34^-/Desmin⁺ Zellen gefunden werden.

Schlussfolgerungen: 1. Transkriptionelle und immunhistologische Untersuchungen zeigen, dass Hepatische Sternzellen im Abcb4 ^-/--Modell bei der Fibrogenese proliferierender Gallengänge mitwirken, aber bei der Fibrogenese des Parenchyms keine Rolle spielen. 2. Die immunhistologischen Ergebnisse legen nahe, dass Desmin⁺ Fibrozyten vermutlich die Mediatoren der Fibrogenese im Abcb4 ^-/--Modell sind und aus CD34⁺-Progenitorzellen entstehen. 3. Inwieweit die Herkunft der CD34⁺ Zellen auf Leber-ständige oder zirkulierende Progenitorzellen zurück zu führen ist, ist noch nicht geklärt.

Literatur: 1. Henkel C, Roderfeld M, Weiskirchen R, Berres ML, Hillebrandt S, Lammert F, Meyer HE, Stuhler K, Graf J, Roeb E. Changes of the hepatic proteome in murine models for toxically induced fibrogenesis and sclerosing cholangitis. Proteomics 2006; 6: 6538-6548. 2. Popov Y, Patsenker E, Fickert P, Trauner M, Schuppan D. Mdr2 (Abcb4)-/- mice spontaneously develop severe biliary fibrosis via massive dysregulation of pro- and antifibrogenic genes. J Hepatol 2005; 43: 1045-1054.

ABCB4 - HSC - MMP - sklerosierenden Cholangitis