Regulation von CTGF durch Hinstondeacetylaseinhibitoren: Auswirkungen auf Angiogenese und Zell-Matrix-Interaktion

Einleitung: Die post-translationale Modifikation von Chromatinbestandteilen ist maßgeblich an der Regulation der Expression von Tumorsuppressorgenen und Onkogenen in Tumoren beteiligt. Die pharmakologische Hemmung von Histondeacetylasen (HDAC) stellt daher einen neuen vielversprechenden Therapieansatz, insbesondere beim hepatozellulären Karzinom dar. Connective Tissue Growth Factor (CTGF) ist ein epigenetisch regulierter Wachstumsfaktor, der sowohl pro- als auch anti-angiogene Eingenschaften besitzt, dessen Expression und Funktion im HCC aber noch unklar ist.

Methoden: Die humanen Hepatomzelllinien HEP3B und HEPG2 wurden unter Standardbedingungen kultiviert und zu verschiedenen Zeitpunkten (12h, 24h, 48h, 72h) mit unterschiedlichen Konzentrationen des neuen Pandeacetylasehemmers Panobinostat (LBH589; 0,1 bzw. 0,01µM) behandelt. Die Analyse erfolgte durch quantitative real-time PCR und Westernblots gegen CTGF, VEGF, VEGF-Rezeptor und MAP-Kinase bzw. P-MAP-Kinase. HEPG2-Xenotransplantate wurden durch tägliche intraperitoneale Injektion mit 10mg/kg KG in männlichen NMRI-Mäusen behandelt. Die Analyse erfolgte nach 1, 7 und 28 Tagen mittels qRT-PCR, Westernblot und Immunhistochemie.

Ergebnisse: Panobinostat hemmt das Wachstum der untersuchten Tumorzellen auch im Xenograft-Modell. Hierbei konnte immunhistochemisch eine signifikant reduzierte Gefäßdichte gezeigt werden. Während in vitro die mRNA-Expression von CTGF durch Panobinostat induziert wurde, konnte im vorliegenden Xenograft-Material nur eine transiente Expression von CTGF nach 7d nachgewiesen werden. VEGF zeigte keine Beeinflussung. Die Expression von CTGF-Protein wurde in vitro ebenfalls gehemmt. Sowohl in vivo als auch in vitro konnte Panobinostat auf Proteinebene MAPK und P-MAPK dosisabhängig hemmen.

Schlussfolgerung: Panobinostat induziert kontextabhängig eine differenzielle Expression von CTGF. Die Anti-Angiogenese wird im vorliegenden Modell nicht über VEGF/FLT vermittelt. Insgesamt ist die Rolle von CTGF noch unklar, so dass weitere Untersuchungen notwendig sind.