Inhibition des Tumorwachstums von etablierten, subkutanen AFP-exprimierenden HCC durch die Kombination von AFP- und IL-12-exprimierenden dendritischen Zellen (DC) in vivo

Einleitung: DC können antigenspezifische T-Zellen gegen Tumorantigene, wie das AFP (α-Fetoprotein), stark stimulieren. Ihr Ansatz gegen das HCC hat allerdings bisher nur begrenzten Erfolg gezeigt. Die Gabe potenter Th1-Zytokine, wie IL-12, kann die antitumorale Wirkung von DC steigern. Ziel dieser Arbeit war zu prüfen, ob sich die spezifische, immunstimulatorische Wirkung von AFP-beladenen DC gegen AFP-positive HCC durch die zusätzliche intratumorale Applikation IL-12-exprimierender DC verstärken lässt.

Methodik: DC wurden aus dem Knochenmark von C3H-Mäusen gewonnen und am Tag 6 adenoviral (Ad-AFP, Ad-IL-12 oder Ad-LacZ als Kontrolle) transduziert. CD80-, CD86- und CD40-Expression wurde durchflusszytometrisch bestimmt. Durch ELISA wurde die IL-12-Expression im DC-Zellüberstand bestimmt. 10⁶ Hepa129-AFP wurden s.c. in C3H-Mäuse zur Tumorinduktion injiziert. Bei einem Tumorvolumen von 100mm³ wurden die Mäuse zweimal mit 0,5×10⁶ AFP-exprimierenden DC s.c. vakziniert. Am Tag 10 erfolgte zusätzlich die i.t.-Gabe von 1×10⁶ IL-12-exprimierenden DC.

Ergebnis: Ad-mIL-12-transduzierte DC zeigten eine konzentrationsabhängige Expression von IL-12. Die Expression von DC-Oberflächenmarkern (CD80, CD86 und CD40) wurde trotz starker adenoviraler Transduktion nicht herabreguliert. Das Tumorvolumen der Mäusen, die mit Ad-IL12/AFP-transduzierten DC behandelt wurden, war 17 Tage nach Tumorinduktion signifikant kleiner (181±54mm³) als das Tumorvolumen von Mäuse, die mit Ad-LacZ/AFP-transduzierten DC behandelt wurden (910±168mm³), p=0,0062. Dementsprechend verlängerte sich die Überlebensdauer signifikant in der Mäuse-Gruppe, die mit AFP/IL12-DC behandelt wurde.

Diskussion: Adenoviraler Gentransfer für IL-12 ermöglicht eine hohe IL-12-Expression in den DC-Überstand. Dies führt zu einer Verstärkung der DC-Immunstimulation. Die i.t.-Gabe IL-12-transduzierter DC konnte die antitumorale Wirkung der Vakzinierung mit AFP-beladenen DC gegen AFP-positive HCC deutlich steigern. Es scheint, dass die i.t.-Gabe von IL-12-DC das immunsuppresive Tumormilieu so verändert, dass die durch AFP-DC induzierten, zytotoxischen T-Zellen die Tumorzellen effektiv bekämpfen können. Dieser Ansatz stellt daher eine Verbesserung der antitumoralen Wirkung von AFP-beladenen DC gegen das HCC dar.