Die Serin/Threonin-Kinase FASTK ist ein wichtiger Regulator des Wachstums und der Viabilität von Pankreaskarzinomzellen

Einleitung: In früheren Hochdurchsatzanalysen wurden Expressionsprofile von ca. 2000 Kandidatengenen sowohl in primären Geweben als auch in verschiedenen Modellsystemen des Pankreaskarzinoms generiert. Zur weiteren Charakterisierung wurden 80 Kandidatengene, mit der entsprechend höchst wahrscheinlichen biologischen Relevanz für zukünftige Diagnose- bzw. Therapiemethoden ausgewählt.

Ziel: In diesem Projekt soll insbesondere die Funktion von FASTK während der Pankreaskarzinogenese charakterisiert werden. Obwohl FASTK bereits Mitte der neunziger Jahre beschrieben wurde, sind die physiologischen Funktionen dieses Gens, insbesondere im Hinblick auf PDAC, weitestgehend unklar geblieben.

Methodik und Ergebnisse: qRT-PCR-Daten bestätigten die Überexpression von FASTK im Tumorgewebe und zeigten weiterhin eine starke FASTK Expression in der Mehrzahl der pankreatischen Tumorzelllinien in vitro. Funktionelle Effekte von FASTK wurden mittels transienter RNAi untersucht. Das Wachstum (BrdU Assay), die Viabilität (MTT Assay) und die Koloniebildungsfähigkeit (Soft Agar Assay) von Krebszellen wurden durch die Herunterregulierung des FASTK Gens erheblich beeinträchtigt. Westernblotanalysen zeigten keine Aktivierung der klassischen Apoptosewege. Xenograft Experimente mit stabilen induzierbaren Zellklonen in Nacktmäusen bestätigten die in-vitro-Ergebnisse. FASTK-defiziente Klone wuchsen deutlich langsamer und kleiner im Vergleich zu den Kontrollgruppen.

Schlussfolgerung und Ausblick: Insgesamt zeigten unsere experimentellen Daten, dass die Herunterregulation von FASTK die Proliferation und Lebensfähigkeit von Pankreaskarzinomzellen, wenn auch ohne die Apoptose zu induzieren, stark beeinflusst. Darüberhinaus werden RNA-Seq-Experimente durchgeführt, um zu untersuchen, welche Wege in Abwesenheit von FASTK beeinflusst werden.

Durch die RNA-Seq Daten und die Generierung von FASTK-KPC transgenen Mäusen erwarten wir eine klaren Überblick bezüglich der pathophysiologischen Rolle von FASTK bei der Entstehung und Progression von Pankreaskarzinoms.