Parallel in vivo and in vitro Studies of the Incorporation of P³² in the Phospholipids of Leukemic Leukocytes

Summary

The incorporation of radioactivity from orthophosphate-P³² in leukocyte phospholipids has been examined in vivo and in vitro in patients with leukaemia. Blood taken before the administration of a therapeutic dose of P³² was incubated with amount of P³² equal to that found in circulation 30 minutes following the intravenous injection of the therapeutic dose.

The distribution of radioactivity found 6 hours later in the phospholipid fraction of leukocytes in patients treated with P³² was examined. At the same time, the incorporation of radioactivity from P³² in the leukocyte phospholipids (cephalin, lecithin, sphingomyelin), taken from the same subject and kept during this time under incubation, was compared to the values observed in vivo.

A fairly good agreement between the in vivo and in vitro distribution in the main fractions of leukocyte phospholipids was found in these experiments.

Résumé

L’introduction de la radioactivité de l’orthophosphate P³² dans les phos-pholipides des leucocytes a été étudiée in vitro et in vivo chez des malades souffrants d’une leucémie. Des échantillons de sang pris avant l’application de P³² ont été incubés avec une quantité de P³² égale à celle qui se trouvait dans la circulation du sang 30 minutes après l’injection intraveineuse de la dose thérapeutique. La distribution de la radioactivité dans la fraction phospho-lipide des leucocytes a été examinée 6 heures après l’application de la dose thérapeutique. En même temps, l’incorporation de la radioactivité dans les phospholipides (céphaline, lécithine, sphingomyéline) des leucocytes mis sous l’incubation, a été comparée avec les valeurs observées in vivo chez le même malade. On a trouvé une correspondance assez favorable de ces deux valeurs.

Zusammenfassung

Der Einbau der Radioaktivität aus P³²-Orthophosphat in Phospholipide von Leukozyten wurde in vivo und in vitro bei Patienten mit Leukämie untersucht. Blutproben, die vor der Verabreichung einer therapeutischen P³²-Dosis abgenommen worden waren, wurden mit einer Menge von P³² inkubiert, die gleich jener war, die im Kreislauf 30 Minuten nach der intravenösen Injektion der Therapiedosis gefunden wurde.

Die Verteilung der Radioaktivität in den Phospholipidfraktionen der Leukozyten wurde 6 Stunden nach der Verabreichung der therapeutischen Dosis untersucht. Gleichzeitig wurde der Einbau der Radioaktivität in die Leukozyten-phospholipide (Cephalin, Lezithin, Sphingomyelin) in den inkubierten Blutproben der gleichen Patienten verglichen mit den Werten, die in vivo beobachtet wurden.

Zwischen den In-vivo- und den In-vitro-Verteilungen in den Hauptfraktionen der Leukozytenphospholipide wurde eine recht gute Übereinstimmung beobachtet.

• References

• 1 Buchanan A. A. Lipid Synthesis by Human Leukocytes in vitro. Biochem. J 75: 315 1960;
• 2 Folch J, Less M, Sloanc-Stanley G. H. A Simple Method for the Isolation of Total Lipids from Animal Tissues. J. Biol. Chem 226: 497 1957;
• 3 Hanahan D. J, Dittmen J. D, Warashina E. A. A Column Chromatographic Separation of Classes of Phospholipids. J. Biol. Chem 228: 685 1957;
• 4 Kidson C. Lipid Synthesis in Human Leukocytes in Acute Leukemia. Australasian Annals of Med 10: 282 1961;
• 5 Levenson S. M, Adams M. A, Rosen H, Taylor F. H. Laskey. Studies in Phosphorus Metabolism in Man. III. The Distribution Exchange and Excretion of Phosphorus in Man Using Radioactive Phosphorus (P³²) as a Tracer. J. Clin. Invest 32: 497 1953;
• 6 Malamos B, Miras C, Levis G. The Phospholipids of Leukemic Leukocytes. Vth Int. Congr. of Biochem.. Moscow: 1961. Section 28.
• 7 Malamos B, Miras C, Levis G, Mantzos J. The in vitro Incorporation of Acetate-1-C¹⁴ into Normal and Leukemic Leukocyte Lipids. J. Lipid Research 3: 222 1962;
• 8 Marks P. A, Gellhorn A, Kidson C. Lipid Synthesis in Human Leukocytes, Platelets and Erythrocytes. J. Biol. Chem 235: 2579 1960;
• 9 Miras C. Unpublished results.
• 10 Miras C. J, Levis C. M. The Incorporation of Acetate-l-C¹⁴ in Phospholipids by Normal and Leukemic White Blood Cells. Proc. of the Greek Academy of Science 36: 16 1961;
• 11 Rowe C. E, Allison A. C, Lovelock J. E. Synthesis of Lipids by Different Human Blood Cell Types. Biochim. et Biophys. Acta 41: 310 1960;