Verwendung von CD44v3 als Biomarker für tumorspezifische Exosomen im Plasma von Kopf-Hals-Karzinom Patienten

Hintergrund Exosomen spielen eine signifikante Rolle bei der Immunsuppression und Tumorprogression. Durch die Isolierung von CD3 (-) und CD3 (+) Exosomen aus dem Plasma von Kopf-Hals Karzinom Patienten (HNSCC) wurden die zellulären Ursprünge der von ihnen getragenen immunregulatorischen Proteine identifiziert. Jedoch besteht ein Mangel an Marker zur gezielten Isolation von tumorspezifischen Exosomen (TEX). Hier präsentieren wir eine Methode zur TEX Isolation.

Methoden Plasma von 25 HNSCC-Patienten und 7 gesunden Spendern wurde zur Exosomenisolation verwendet. Die Exosomen wurden mittels einer bead-basierter Methode mit CD3 oder CD44v3 separiert. Durchflusszytometrie wurde zum Nachweis von FAS-L, CSGP4, PD-L1, TGFβ, EGFr und Fas-Ligand verwendet. Eine Korrelation der Ergebnisse mit den klinischen Parametern wurde durchgeführt.

Ergebnisse Die CD44v3-Level waren sowohl in den Exosomen der HNSCC-Zelllinien als auch in der CD3 (-) Fraktion (angereichert mit TEX) von Exosomen aus dem Patientenplasma signifikant erhöht. Die CD44v3 Oberflächenlevels auf CD3 (-) Exosomen korrelierte signifikant mit dem UICC-Stadium und der Lymphknotenmetastasierung. Darüber hinaus waren die CD44v3-Spiegel auf CD3 (-) Exosomen bei HNSCC Patienten höher als bei gesunden Spendern. Die Separierung von CD44v3 (+) Exosomen zeigte nicht nur signifikant höhere Level an PD-L1, CSGP4, TGFϐ, EGFr und FAS-L als CD44v3 (-) Exosomen sondern auch eine Korrelation dieser Marker mit klinischen Parametern.

Schlussfolgerung Die Separierung von Exosomen mit CD44v3 stellt eine Möglichkeit zur TEX-Anreicherung dar und kann als „liquid Biomarker“ für die Tumorlast und Tumorstadium dienen.

Poster-PDF A-1053.PDF

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Article published online:
10 June 2020