Zentralbl Gynakol 2002; 124(8/9): 406-412
DOI: 10.1055/s-2002-38130
Original article

© Georg Thieme Verlag Stuttgart · New York

CD8+CD45RA+CD27-CD28-T-cell subset in PBL of cervical cancer patients representing CD8+T-cells being able to recognize cervical cancer associated antigens provided by HPV 16 E7

Können CD8+CD45RA+CD27-CD28-T-Zell-Subpopulationen in den peripheren Blutlymphozyten von Patientinnen mit Gebärmutterhalskarzinom, die periphere CD8-T-Zellen repräsentieren, tumorassoziierte Epitope von HPV16 E7 erkennen?H. Pilch1 , H. Hoehn2 , M. Schmidt1 , E. Steiner1 , B. Tanner1 , R. Seufert1 , M. Maeurer2
  • 1Department of Obstetrics and Gynecology, Johannes Gutenberg-University of Mainz, Germany
  • 2Institute of Medical Microbiology, Johannes Gutenberg-University of Mainz, Germany
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Publication Date:
24 March 2003 (online)


Objective: In response to antigenic stimulation, naive MHC-class I restricted and antigen-specific CD8+CD45RA+CD28+T-cells undergo clonal expansion and differentiate into CD8+CD45RO+ memory T-cells. Upon re- encounter with the nominal antigen, CD45RO+ T-cells are able to convert to CD8+CD45RA+CD28-T-cells displaying potent immune effector functions, including TNF-α production. This T-cell subpopulation constitutes a minor population in healthy individuals. In the present study we are currently evaluating whether this particular T-cell subset in PBL represents CD8+T-cells which may be able to recognize cervical cancer associated antigens provided by HPV 16 E7.

Material and Methods: Flow-cytometric cell sorted CD8+CD45RA+CD28- and CD8+CD45RA+CD28-T-cells were obtained from patients with cervical cancer and tested for recognition of HLA-A2 restricted peptides derived from the human papillomavirus (HPV)16-E7 gene product using ELISA. HPV DNA in tumor tissue was detected by PCR.

Results: We show that the effector CD8+CD45RA+CD28-T-cell subset is expanded in peripheral blood lymphocytes (PBL) from patients with cervical cancer, but also in PBL from patients with an acute mycobacterial infection. CD8+T-cells from 3/6 cancer patients showed a peptide-specific immune response which could be segregated in peptide epitopes which elicited either a strong TNF-α production, or GM-CSF and IL-2 secretion. Peptide-reactivity could exclusively be detected in the ex vivo freshly isolated CD8+CD45RA+CD28-T-cell population. A similar situation was found to be true for HLA-A2 presented peptide epitopes derived from M. tuberculosis-associated antigens presented to T-cells obtained from patients with tuberculosis.

Conclusions: The sorting of CD8+CD45RA+CD28-T-cells enables to determine the fine specificity of CD8+ effector T-cells without the need for in vitro manipulation and aids to define the most appropriate target epitopes for novel vaccine designs.


Fragestellung: Im Rahmen einer Antigen-Stimulation könnenÂ’naive, MHC-Klasse I restringierte, antigen-spezifische CD8+CD45RA+CD28+T-Zellen proliferieren und sich in CD8+CD45RO+Gedächtniszellen differenzieren. Nach erneuter Antigen-Stimulation können sich diese Gedächtniszellen in CD45RA+CD28-Effektorzellen transformieren. Bei gesunden Probanden lässt sich diese T-Zell-Subpopulation nur in vergleichsweise geringem Umfang nachweisen. In der vorliegenden Arbeit soll untersucht werden, ob periphere CD8+T-Zellen bei Patientinnen mit Gebärmutterhalskrebs entsprechende Effektorzellen repräsentieren, die in der Lage sind, Tumor- assoziierte Epitope von HPV 16 E7 spezifisch zu erkennen.

Material und Methode: Aus Blutproben von HLA-A2 positiven Zervixkarzinompatientinnen wurden CD8+CD45RA+CD28+/-T-Zellen flowzytometrisch sortiert und mittels ELISA hinsichtlich ihrer spezifischen Immunreaktivität gegenüber HLA-A2 restringierten Peptiden von HPV16 E7 getestet. Mithilfe der PCR wurde HPV DNA im Tumorgewebe detektiert.

Ergebnisse: Wir können zeigen, dass CD8+CD45RA+CD28-Effektorzellen im Blut von Zervixkarzinompatientinnen klonal expandiert sind. Eine vergleichbare Reaktion lässt sich aber auch bei Patienten mit florider Lungentuberkulose (Kontrolle) evaluieren. Bei 3 von 6 Tumorpatientinnen ließen sich gemessen an einer signifikanten Sekretion von TNF-α, GM-CSF und Interleukin 2 HPV 16 E7 spezifische CD8+T-Zellen nachweisen. Eine vergleichbare Peptid-spezifische Immunreaktion von CD8+T-Zellen auf HLA-A2 restringierte Epitope von M. tuberkulosis konnte auch bei Tuberkulosepatienten objektiviert werden.

Schlussfolgerungen: Die Sortierung von CD8+CD45RA+CD28-T-Zellen bietet die Möglichkeit, die spezifische Immunreaktivität von Effektorzellen direkt ex vivo zu evaluieren und möglicherweise geeignete Zielepitope für einen spezifischen Impfstoff zu definieren.


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Priv.-Doz. Dr. med. Henryk Pilch

Department of Obstetrics and Gynecology Johannes Gutenberg-University of Mainz

Langenbeckstr. 1

55101 Mainz


Email: HPilch3920@aol.com