The Commercially Available ELISA for Pancreatic Elastase 1 Based on Polyclonal Antibodies Does Measure an as Yet Unknown Antigen Different from Purified Elastase 1. Binding Studies and Clinical Use in Patients with Exocrine Pancreatic Insufficiency

Zusammenfassung

Die Bestimmung der fäkalen Elastase-1-Konzentration mit einem auf monoklonalen Antikörpern basierenden ELISA (ELISA 1) hat als indirekter Test der exokrinen Pankreasfunktion weite Verbreitung gefunden. Dieser Test wurde mit direkten Pankreasfunktionstests sowie der Pankreas-ERCP-Morphologie validiert. Kürzlich wurde ein neuer, auf polyklonalen Antikörpern basierender ELISA (ELISA 2) eingeführt, der ebenfalls Elastase-1-Test heißt. In der vorliegenden Arbeit wurden Bindungsstudien mit hochgereinigter humaner Elastase 1 sowie Messungen von Stuhlproben von Patienten mit exokriner Insuffizienz mit beiden Testsystemen durchgeführt. Überraschenderweise wurde hochgereinigte Elastase 1 durch die primären, auf der Platte immobilisierten polyklonalen Antikörper (Catcher-Antibodies) von ELISA 2 nicht gebunden. Die Antikörper scheinen mit bisher unbekannten Antigenen zu reagieren. In den Patientenproben zeigte sich eine schwache Korrelation beider Assays, allerdings erschienen die Messwerte mit dem polyklonalen System höher. Unter Verwendung der angegebenen Cut-off-Werte hatten daher einige Patienten mit pankreatischer Steatorrhö Normalwerte in ELISA 2. Da der gängige Normalbereich in klinischen Studien mit ELISA 1 charakterisiert wurde, ist es notwendig, ELISA 2 im Vergleich mit direkten Testverfahren neu zu evaluieren. Der Name Elastase-1-Test für ELISA 2 sollte geändert werden, da der Test gereinigte Elastase 1 nicht erkennt.

Abstract

The measurement of fecal elastase 1 concentrations by means of an ELISA based on monoclonal antibodies (mABs) highly specific for human elastase 1 (ELISA 1) has become an accepted indirect test of the exocrine pancreatic function during the last years. Its use has been demonstrated in many clinical studies including comparison with direct function tests and ERCP morphology. Recently, a new ELISA, also named "elastase 1" based on polyclonal antibodies (pABs; ELISA 2) became available. In the present investigation we performed binding studies with purified elastase 1 as well as studies on patients with exocrine insufficiency with both ELISAs. Surprisingly, the pABs on the solid phase (catcher antibodies) of ELISA 2 did not bind purified elastase 1. These antibodies seem to react with an as yet unknown antigen associated with elastase 1. Measurement of samples from patients suspected to suffer from exocrine insufficiency showed a weak correlation of both assays but higher levels in ELISA 2, resulting in false normal results even in some patients with pancreatic steatorrhea. Since the reference range used in both assays has been established using ELISA 1, ELISA 2 must be re-evaluated in comparison to direct function tests. ELISA 2 should be renamed, since obviously it does react with an antigen (antigens) different from elastase 1.

Exokrine Pankreasfunktion - Elastase 1 - chronische Pankreatitis - Steatorrhö - ELISA

Exocrine pancreatic function - elastase 1 - chronic pancreatitis - steatorrhea - ELISA

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