Diagnostic Algorithm for Chronic Hepatitis C Virus Infection: Role of the New HCV-Core Antigen Assay

Zusammenfassung

Hintergrund: Die Diagnose einer chronischen Hepatitis C basiert derzeit auf dem Nachweis von HCV-RNA im Serum. Wir untersuchten die Rolle eines neuen serologischen Tests zur Detektion und Quantifizierung von HCV-Core-Antigen für die Diagnose einer chronischen Hepatitis-C-Virusinfektion. Patienten und Methoden: Zuvor mit vier verschiedenen HCV-RNA-Quantifizierungstests (Superquant, NGI; HCV-Monitor v 1.0 und v 2.0; Quantiplex 2.0) untersuchte Serumproben von 192 unbehandelten Patienten wurden mit dem trak-C-Test (Ortho Clinical Diagnostics, Raritan, NJ, USA) untersucht. Zusätzlich wurden bei 52 Patienten parallel Plasma und Serum untersucht. Bei 59 Patienten wurde eine Serumprobe mehrmals untersucht. Ergebnisse: 172/192 (89,6 %) der Proben unbehandelter Patienten zeigten ein positives Resultat mit dem trak-C-Test. Alle bis auf 2 der trak-C-positiven Proben waren auch PCR-positiv für HCV-RNA. Nur 4 der 20 trak-C-negativen Proben waren in 2 RNA-Tests positiv mit niedriger Viruslast (< 30 000 copies/ml). Das quantitative Ergebnis des trak-C zeigte eine sehr gute Korrelation zu den HCV-RNA-Spiegeln der verschiedenen HCV-RNA-Tests (r > 0,72; p > 0,001), gute Reproduzierbarkeit bei Re-Testung und gepaarten Serum/Plasma-Proben, unabhängig vom Genotyp. Schlussfolgerung: Basierend auf der guten Reproduzierbarkeit, der Einfachheit und dem vermutlich niedrigeren Preis von trak-C im Vergleich zu molekularen Nachweismethoden der HCV-Virämie, würden wir einen alternativen diagnostischen Algorithmus für die Hepatitis-C-Virusinfektion vorschlagen. trak-C könnte „Nucleotid Assay Tests” als initiale Bestätigung bei anti-HCV-positiven Patienten ersetzen. NAT würde nur bei trak-C-negativen Proben benötigt werden.

Abstract

Background: The diagnosis of chronic hepatitis C virus infection is based on nucleic acid testing (NAT) for HCV-RNA. We evaluated whether total HCV core antigen testing could be a substitute for NAT testing. Patients and Methods: Samples from 192 untreated chronic HCV positive patients previously tested for HCV-RNA by four different commercially available assays (SuperQuant, Amplicor HCV Monitor v 1.0 and v 2.0, Quantiplex) were tested for total HCV core antigen using the Ortho trak-C assay (Ortho Clinical Diagnostics, Raritan, NJ, USA). Furthermore, 52 HCV-RNA positive paired serum and plasma samples were analysed. Finally, inter-assay coefficients of variation for core antigen were determined by repeated testing of 59 samples. Results: 172/192 (89.6 %) samples from untreated HCV patients showed positive results with the trak-C assay. Importantly, all but two trak-C positive samples were NAT positive. Only four of the twenty trak-C negative samples tested positive by two NAT assays with viral loads below 30,000 copies/mL. Moreover, HCV core antigen levels correlated significantly with HCV-RNA levels (r > 0.72; p > 0.001), gave consistent results in paired serum and plasma samples (r = 0.991), and showed a very low inter-assay variability (r = 0.943) independent of genotype. Conclusion: Based on the performance characteristics, easiness of use, and potential lower cost of the core Ag assay, we propose an alternative testing algorithm for establishing the diagnosis of chronic HCV infection in which the trak-C assay could substitute for NAT as the first choice for detection of HCV viraemia in anti-HCV positive individuals. NAT would only be necessary in rare cases with low viral load.

Schlüsselwörter

HCV - Core-Antigen - Diagnostik

Key words

HCV - total core antigen - diagnostics

References

• 1 Hoofnagle J H. Course and outcome of hepatitis C.  Hepatology. 2002;  36 21-29
• 2 Seeff L B, Hoofnagle J H. National Institutes of Health consensus development conference: management of hepatitis C: 2002.  Hepatology. 2002;  36 1-2
• 3 Pawlotsky J M. Use and interpretation of virological tests for hepatitis C.  Hepatology. 2002;  36 65-73
• 4 Aoyagi K, Ohue C, Iida K. et al . Development of a simple and highly sensitive enzyme immunoassay for hepatitis C virus core antigen.  J Clin Microbiol. 1999;  37 1802-1808
• 5 Orito E, Mizokami M, Tanaka T. et al . Quantification of serum hepatitis C virus core protein level in patients chronically infected with different hepatitis C virus genotypes.  Gut. 1996;  39 876-880
• 6 Bouvier-Alias M, Patel K, Dahari H. et al . Clinical utility of total HCV core antigen quantification: a new indirect marker of HCV replication.  Hepatology. 2002;  36 211-218
• 7 Pradat P, Chossegros P, Bailly F. et al . Comparison between three quantitative assays in patients with chronic hepatitis C and their relevance in the prediction of response to therapy.  J Viral Hepat. 2000;  7 203-210
• 8 Ishak K, Baptista A, Bianchi L. et al . Histological grading and staging of chronic hepatitis.  J Hepatol. 1995;  22 696-699
• 9 Shiffman M, Ferreira-Gonzalez A, Reddy R. et al . Comparison of three commercially available assays for HCV RNA using the international unit standard: Implications for management of patients with chronic hepatitis C virus infection in clinical practice.  Am J Gastroenterology. 2003;  98 184-189
• 10 Blatt L, Muchnick M, Tong M. et al . Assessment of hepatitis C virus RNA and genotype from 6807 patients with chronic hepatitis C in the United States.  J Viral Hepatitis. 2000;  7 196-202
• 11 Veillon, P, Payan C. et al . Comparative evaluation of the total HCV core antigen, branched DNA, and Amplicor Monitor assays in determining viremia in patients with chronic hepatitis C infection, and during interferon plus ribavirin combination therapy.  J Clin Microbiology. 2003;  41 3212-3220
• 12 Zanetti A, Romano L, Brunetto M. et al . Total HCV core antigen assay: A new marker of hepatitis C viremia for monitoring the progress of therapy.  J Medical Virology. 2003;  70 27-30
• 13 Cornberg M, Wedemeyer H, Manns M P. Treatment of chronic hepatitis C with PEGylated interferon and ribavirin.  Curr Gastroenterol Rep. 2002;  4 23-30
• 14 Wedemeyer H, Caselmann W H, Manns M P. Combination therapy of chronic hepatitis C: an important step but not the final goal!.  Journal of Hepatology. 1998;  29 1010-1014
• 15 Maynard M, Buti M, Estaban J I. et al . High clinical relevance of total HCV core antigen testing for monitoring and predicting response to PEG-IFN/ribavirin combination therapy.  Hepatology. 2002;  36 353A
• 16 Maynard M, Pradat P, Berthillon P. et al . Clinical relevance of total HCV core Ag testing for hepatitis C monitoring and for predicting patients’ response to therapy.  J Viral Hepatitis. 2003;  10 318-323