PGD2-abhängige Potenzierung der Phenobarbital-induzierten CYP2B1 Expression in primär kultivierten Rattenhepatocyten

Einleitung: In vorangegangenen Untersuchungen war gezeigt worden, dass synthetische Liganden des Peroxisomen-Proliferator-aktivierten Rezeptors α (PPARα) die Phenobarbital-abhängige Induktion von CYP2B1 potenzieren können. PGD2, das von Kupfferzellen vorwiegend gebildete Prostanoid, kommt als potentieller endogener Ligand für PPARα in Hepatocyten in Frage. Daher sollte geprüft werden, ob PGD2 die Phenobarbital-abhängige Induktion von CYP2B1 potenzieren kann. Methoden: Rattenhepatocyten wurden auf collagenierten Zellkulturplatten in Williams E Medium mit dem Zusatz von Insulin, Transferrin, Selen, und Dexamethason kultiviert. Nach 24h Vorkultur wurden sie für 48h mit Phenobarbital und während der letzten 24h zusätzlich mit PGD2 induziert. Das CYP2B-Protein und die CYP2B-Aktivität wurden in Mikrosomen durch Western-Blot und den 7-Pentoxyresorufin-O-Depentylierungs-Assay bestimmt. Ergebnisse: In unbehandelten Hepatocyten war CYP2B weder im Western-Blot noch im Enzymassay nachweisbar. Phenobarbital induzierte CYP2B. PGD2 hatte keinen signifikanten Einfluss auf die basale CYP2B-Expression oder -Aktivität. Gleichzeitige Inkubation mit PGD2 und Phenobarbital steigerte jedoch die Phenobarbital-induzierte CYP2B Expression auf Protein- wie Aktivitätsebene um etwa 50%. Diskussion: PGD2, das aus Kupfferzellen Phenobarbital-abhängig vermehrt gebildet werden kann [1], könnte im Rahmen einer interzellulären Kommunikation zwischen Kupfferzellen und Hepatocyten die Phenobarbital-abhängige Induktion von CYP2B1 in Hepatocyten steigern.

Literatur: 1 Kroll, B., Kunz, S., Klein, T. and Schwarz, L. R. (1999) Effect of lindane and phenobarbital on cyclooxygenase-2 expression and prostanoid synthesis by Kupffer cells. Carcinogenesis 20, 1411-6.

Schlüsselwörter

Cytochrom P450 - Fremdstoffmetabolismus - Peroxisomenproliferator Aktivierter Rezeptor (PPAR)alpha - Phenobarbital - Prostanoide