Retrospektive Marker-Analysen durchgeführt an Blut- und Knochenmark-Ausstrichen mittels eines immunenzymatischen Verfahrens (APAAP-Technik)*, **

Abstract

In the present study the possibility of immunophenotyping of routinely prepared (air dried) peripheral blood and bone marrow smears is described after storage. The immunoenzymatical alkaline-phosphatase- anti-alkaline-phosphatase (APAAP)-method was carried out in differently stored blood smears ( + 4°C and -80°C). Last results were compared with originals made from freshly prepared mononuclear cells at time of diagnosis. The results showed no remarkable decrease of antigenicity, neither under the procedure refrigeration and thawing of the frozen smears (-80°C), nor under storage conditions of more than 22 months. In our opinion this highly sensitive method enables us to get additional results from unexplained haematological disorders using retrospective analysis.

Zusammenfassung

In der vorliegenden Arbeit wird über die Möglichkeit berichtet, immunologische Phänotypisierungen an gelagerten Routine-Ausstrich-Präparaten von Blut- und Knochenmark-Proben vorzunehmen. Die immunenzymatische Alkalische-Phosphatase-Anti-Alkalische-Phosphatase (APAAP)-Methode wurde an unterschiedlich gelagerten Ausstrichen durchgeführt ( +4°C bzw. -80°C) und mit den Typisierungsergebnissen verglichen, die zum Zeitpunkt der Diagnosestellung an frischen mononukleären Zellen derselben Patientenprobe ermittelt wurden. Die Ergebnisse zeigen, daß sowohl die Einfrier- und Auftau-Prozedur der tiefgefrorenen Präparate ( -80 °C), als auch eine längerfristige Aufbewahrung (über 22 Monate bei dieser Temperatur) keinen nennenswerten Antigenverlust zur Folge haben. Wir glauben, daß uns diese Tatsache in die Lage versetzt, mittels der hohen Nachweisempfindlichkeit der Methode durch retrospektive Analysen zusätzliche Erkenntnisse über unklare hämatologische Erkrankungen zu gewinnen.