SP-D erhöht die Aufnahme von Allergenpartikeln in humane Epithelzellen

Einleitung: Gräserpollen setzen allergenhaltige Stärkegranula (pollen starch granules – PSG) frei, die aufgrund ihrer Größe von 1–1,5µm in die terminalen Atemwege gelangen können. Dort ansässige Alveolarmakrophagen nehmen diese PSG auf und Surfactantprotein (SP)-D verstärkt diese Aufnahme. In der vorliegenden Studie wurde die Aufnahme der PSG in humane primäre bronchiale Epithelzellen und alveoläre Epithelzellen (A549) unter dem Einfluss der Surfactantproteine-A und SP-D untersucht.

Methoden: Primäre bronchiale Epithelzellen wurden bronchoskopisch mittels Bürstenabstrich von 9 gesunden Probanden gewonnen und in Kultur genommen. Daneben wurden A549-Zellen verwendet. Die PSG wurden aus Phleum pratense Pollen isoliert und mit dem Fluoreszenzfarbstoff AlexaFluor 488 markiert. Konfluent gewachsene Epithelzellen wurden mit PSG für 8 Stunden alleine oder unter Zusatz von SP-A, SP-D sowie den Inhibitoren D-Maltose, Mannan und Cytochalasin D inkubiert. Die Partikelaufnahme wurde mittels Durchflusszytometrie und konfokaler Mikroskopie gemessen.

Ergebnisse: PSG wurden von den Epithelzellen dosisabhängig aufgenommen. SP-D (1 µg/ml) erhöhte den Anteil PSG-positiver bronchialer Epithelzellen (p <0,05) jedoch nicht den Anteil PSG-positiver A549-Zellen. Bei einer SP-D-Konzentration von 10µg/ml wurde die Aufnahme der PSG sowohl in primäre bronchiale Epithelzellen als auch in A549-Zellen erhöht (p jeweils <0,05). SP-A induzierte keine Veränderungen der PSG-Aufnahme. Eine signifikante Inhibition der Aufnahme von PSG in primäre bronchiale Epithelzellen wurde durch Cytochalasin D erreicht. Bei den A549-Zellen zeigte keiner der Inhibitoren einen Effekt.

Schlussfolgerung: Unsere Ergebnisse zeigen, dass PSG von primären bronchialen Epithelzellen und A549-Zellen aufgenommen werden. SP-D steigert die PSG-Aufnahme bei primären bronchialen Epithelzellen stärker als bei A549-Zellen.

Gefördert durch: DFG, SFB587, B8