Summary
Diethylstilbestrol diphosphate has been trace-labeled with 131 I in the diethyl-stilbestrol moiety, to moderately high specific activities, by 2
methods. The exchange method of iodination resulted in a mixture of the diphosphate,
monophosphate and diethylstilbestrol in varying proportions, all radioiodinated. A
method of removing unbound radioiodide is described. The estrogenic potency is similar
to that of the original starting material.
The radioiodine is firmly bound and resists removal by chromatography and electrophoresis
as well as by enzymological dephosphorylation. The radioiodinated material was dephosphorylated
by a plant acid phosphatase indicating that this enzyme preferentially acted on the
monophosphate which was present or formed, and that the radioiodinated diethylstilbestrol
found was probably produced from the monophosphate. The enzymolysis of the diphosphate
was less marked and the probability exists that the diphosphate is converted first
to the monophosphate. The enzyme was not inactivated by the monophosphate present.
The chromatographic and electrophoretic separations are described as well as some
solubilities of the mixture of labeled phosphates and diethylstilbestrol described
above.
A subsequent report will be presented of the studies in animals and human patients
with prostatic carcinomata and metastases using the radioiodinated diethylstilbestrol
diphosphate.
Résumé
La partie diéthylstilbestrol du diéthylstilbestroldiphosphate a été marquée au 131 I à une activité spécifique modérément élevée, au moyen de 2 méthodes. La méthode
d’iodination à échange a donné un mélange de diphosphate, monophosphate et diéthylstilbestrol
radioiodinés dans les proportions variées. La méthode d’élimination du radioiodide
non lié est décrite. Le potentiel estrogéne est similaire à celui du produit original.
Le radioiode est puissamment lié et résiste à la séparation chromatographi-que et
électrophorétique ainsi qu’à la déphosphorylisation enzymologique. Le materiel radioiodiné
a été déphosphorylisé par la phosphatase acide de la plante. Ce fait montre que l’enzyme
agit préférablement sur le monophosphate présent ou formé et que le diéthylstilbestrol
radioiodiné a été probablement produit à partir du monophosphate. L’enzymolyse du
diphosphate a été moins accentuée et il est probable que le diphosphate a été converti
d’abord au monophosphate. L’enzyme n’a pas été inactivé par le monophosphate présent.
La chromatographic et les séparations électrophorétiques sont décrites ainsi comme
quelques solubilités du mélange ci-dessus mentionné du diéthylstilbestrol et des phosphates
marqués.
Un future rapport sera consacré aux études sur les animaux ainsi que sur les malades
avec un cancer de prostate et des métastases, chez lesquelles l’application du diéthylstilbestrolphosphate
est indiquée.
Zusammenfassung
Auf zwei verschiedene Weisen wurde Diäthylstilböstroldiphosphat im Diäthyl-stilböstrolanteil
mit 131 J zu mäßig hoher spezifischer Aktivität markiert. Die Jod-austauschmarkierung bestand
in einer Mischung von radiojodiertem Diphosphat, Monophosphat und Diäthylstilböstrol
in verschiedenen Verhältnissen. Eine Methode zur Entfernung des freien Radiojodids
wird beschrieben. Die Östrogen-aktivität ist der des Ausgangsmaterials ähnlich.
Das Radiojod ist fest gebunden und läßk sich weder durch Chromatographic und Elektrophorese
noch durch enzymatische Dephosphorylierung abtrennen. Das radiojodierte Material wurde
durch Pfianzensäurephosphatase dephosphoryliert, was darauf hinweist, daß dieses Enzym
vorwiegend mit dem vorhandenen oder entstandenen Monophosphat reagierte und daß das
vorgefundene radiojodierte Diäthylstilböstrol möglidierweise aus dem Monophosphat
entstand. Die En-zymolyse des Diphosphats war weniger ausgeprägt und es ist wahrscheinlich,
daß das Diphosphat zuerst in Monophosphat umgewandelt wurde. Das Enzym wurde von dem
anwesenden Monophosphat nicht inaktiviert.
Die chromatographischen und elektrophoretischen Trennungen werden ebenso beschrieben
wie einige Löslichkeiten der oben beschriebenen Mischung von mar-kierten Phosphaten
und Diäthylstilböstrol.
Ein nachfolgender Bericht wird sich mit Studien an Versuchstieren wie auch an Patienten
mit Prostatakarzinom und Metastasen befassen, bei denen radio-jodiertes Diäthylstilböstroldiphosphat
Verwendung findet.
