Quantification of Oxcarbazepine and Its Active Metabolite 10-Hydroxycarbazepine in Human Plasma by High-performance Liquid Chromatography

Summary

A simple, sensitive and selective high-performance liquid chromatography (HPLC) method with ultraviolet detection (230 nm) was developed and validated for the quantification of oxcarbazepine (CAS 28721-07-5), a new antiepileptic drug, and its active metabolite 10-hydroxycar-bazepine (CAS 29331-92-8) in human plasma. Following solid-phase extraction, the analytes and internal standard (zaleplon, CAS 151319-34-5) were separated using an isocratic mobile phase on a reverse phase C₁₈ column. The lower limit of quantification was 50 ng/mL for oxcarbazepine and 100 ng/mL for 10-hydroxycarbazepine with a relative standard deviation of less than 10 %. A linear dynamic range of 50 to 5000 ng/mL for oxcarbazepine and of 100 to 10000 ng/mL for 10-hydroxycarbazepine was established. This HPLC method was validated with between-batch precision of 0.8 to 8.6 % and 3.2 to 7.5 % for oxcarbazepine and 10-hydroxycarbazepine respectively. The between-batch accuracy was 94.0 to 102.4 % and 95.4 to 105.6 %, respectively. Stability of oxcarbazepine and 10-hydroxycarbazepine in plasma was excellent, with no evidence of degradation during sample processing (autosampler) and 30 days storage in a freezer. This validated method is sensitive, simple and repeatable enough to be used in pharmacokinetic studies.

Zusammenfassung

Quantifizierung von Oxcarbazepin und seinem aktiven Metaboliten 10-Hydroxycarbazepin in humanem Plasma durch Hochleistungs-Flüssigchromatographie

Zur Quantifizierung von Oxcarbazepin (CAS 28721-07-5), einem neuen Antiepileptikum, und seinem aktiven Metaboliten 10-Hydroxycarbazepin (CAS 29331-92-8) in humanem Plasma wurde eine einfache, empfindliche und selektive Hochleistungs-Flüssigchromatographie-Methode mit Ultraviolett-Detektion (230 nm) entwickelt und validiert. Nach Extraktion aus der festen Phase wurden Analyt und interner Standard (Zaleplon, CAS 151319-34-5) mittels isokratischer mobiler Phase auf einer C₁₈-Reverse-Phase-Säule getrennt. Die untere Bestimmungsgrenze war für Oxcarbazepin 50 ng/ml, für 10-Hydroxycarbazepin 100 ng/ ml mit einer relativen Standardabweichung von unter 10 %. Als linearer Bereich wurde für Oxcarbazepin 50 bis 5000 ng/ml und für 10-Hydroxycarbazepin 100 bis 10000 ng/ml gefunden. Die Validierung dieser HPLC-Methode ergab Streuungen von 0,8 bis 8,6 % bzw. 3,2 bis 7,5 % und Genauigkeiten von 94,0 bis 102,4 % bzw. 95,4 bis 105,6 % für 10-Hy-droxycarbazepin zwischen den Bestimmungen. Die Stabiliät von Oxcarbazepin und 10-Hydroxycarbazepin in Plasma war ausgezeichnet; es gab keine Anzeichen für Degradation während der Probenbehandlung (Autosampler) und 30 Tagen Aufbewahrung im tiefgefrorenen Zustand. Die validierte Methode ist wegen ihrer Empfindlichkeit, Einfachheit und Wiederholbarkeit geeignet für pharmakokinetische Studien.

Key words

Antiepileptic drugs - CAS 28721-07-5 - CAS 29331-92-8 - High-performance liquid chromatography - Oxcarbazepine - metabolite - quantification in human plasma