Desenvolvimento de cultura celular 3D nos tumores da coluna vertebral

Introdução: O desenvolvimento da cultura celular 2D foi fundamental para o desenvolvimento e entendimento dos fármacos em oncologia. Com o surgimento da cultura tridimensional, foi possível reduzir as limitações da cultura 2D e aprofundar o estudo dos tumores próximo da condição in-vivo.

Objetivo: Desenvolver modelo de cultura celular tridimensional para o estudo das neoplasias primárias e secundárias da coluna vertebral.

Materiais e métodos: Foram selecionadas duas amostras de tumores ressecados (schwannoma e lesão secundária de neoplasia de mama). A amostra foi picotada e digerida utilizando Dispase II (Sigma-Aldrich) com incubação de 45 minutos a 37°C agitando vigorosamente a cada 5 minutos. Foi adicionado tripsina-EDTA e tecido foi fragmentação manualmente com a utilização de agulhas. Amostra foi filtrada em Easystrainer (Greiner) 70 um. Filtro foi lavado com meio DMEM/F!2 com 10% de soro fetal bovino. Amostra foi novamente passada em seringa e filtrado em em Easystrainer (Greiner) 40 um. Filtro foi lavado com meio DMEM/F!2 com 10% de soro fetal bovino. Após centrifugação, sobrenadante foi descartado e células ressuspensas em DMEM/F12 com 10% de soro fetal bovino e plaqueadas em placa de cultura de 35 mm. Após uma semana de cultivo, células foram incubadas com Nanoshuttle (Greiner), subcultivadas e plaqueadas em placa de 96 poços Cell Repellent (Greiner) em presence de imã. Após 18 horas as esferas foram formadas e o imã retirado.

Resultados: Os resultados foram documentados por meio das imagens microscópicas (Figuras 1 e 2).

Conclusão: O estudo das células tumorais em cultura 3D é fundamental para o avanço no tratamento dos tumores da coluna vertebral e outros locais. O desenvolvimento de um modelo para isso é o primeiro passo deste estudo.