Microscopie confocale colique: résultats préliminaires d'une analyse ex vivo

Introduction:

La microscopie confocale permet d'obtenir des images tissulaires/cellulaires in vivo. Cette technologie a été récemment appliquée à l'endoscopie digestive. Nous rapportons notre expérience préliminaire d'une étude ex vivo utilisant un prototype (Mauna Kea Technologies, Paris, France) en cours de développement.

Matériels et Méthodes:

Dans cette étude ex-vivo, 4 pièces de colectomie pour adénocarcinomes ainsi que 9 polypes réséqués à l'anse (taille moyenne=13,3mm) correspondant a des adénomes tubulo-villeux (n=7) et à des polypes hyperplasiques (n=2) ont été étudiés par microscopie confocale fibrée. Cette fibre (sonde Proflex 1,5mm de diamètre) permet une introduction à travers le canal opérateur d'un endoscope et émet un faisceau laser à une longueur d'onde excitatrice de 488 nm. Elle acquiert des images en temps réel avec une résolution latérale de 5µm sur un champ de vision de 400×280µm à une vitesse de 12 images/s. Trois fluorophores ont été testés à différentes concentrations: la fluorescéine (1/1000, 1/10000), l'acriflavine (1/20000, 1/1200000) et l'acétate de crésyl violet (1/100, 1/1000) pour l'analyse des pièces de colectomie et de la muqueuse périphérique normale. L'analyse des polypes réséqués se faisait en salle d'endoscopie immédiatement après l'ablation par coloration au crésyl violet à 1%.

Résultats:

Les trois solutions fluorophores ont permis l'acquisition d'images permettant de distinguer clairement la disposition et les orifices des glandes coliques. Cependant, l'acriflavine permettait d'obtenir de meilleures images que la fluorescéine et l'acétate de crésyl violet.

L'examen de la muqueuse normale montrait des glandes régulièrement disposées et une fluorescence tissulaire intense. En revanche, l'examen des adénocarcinomes, des polypes adénomateux et des polypes hyperplasiques montrait respectivement a) un aspect complètement désorganisé avec une disparition des cryptes et b) un aspect régulier mais franchement élargi des glandes coliques et c) un aspect régulier et peu élargi des glandes coliques.

Conclusion:

Ces résultats préliminaires effectués ex vivo sur des pièces opératoires et de polypectomie ont montré les possibilités de cette nouvelle technique de microscopie confocale fibréeavec acquisition d'images précises de la morphologie des cryptes coliques humaines. Parmi les fluorophores utilisés, l'acriflavine produisait les images de meilleure qualité. Une étude in vivo est indispensable afin d'évaluer les possibilités réelles de cette nouvelle technique, d'adapter les concentrations des différents fluorophores et d'élaborer une nouvelle sémiologie permettant une analyse immédiate des polypes ou des tumeurs rectocoliques.