Download PDF
CC BY 4.0 · Revista Brasileira de Cirurgia Plástica (RBCP) – Brazilian Journal of Plastic Surgery 2024; 39(01): 217712352023rbcp0819pt
DOI: 10.5935/2177-1235.2023RBCP0819-PT
Artigo Original

Criopreservação de células-tronco mesenquimais do tecido adiposo: Uma alternativa para lipoenxertia seriada na reconstrução mamária

Article in several languages: português | English
MARCELO MORENO 
1   Universidade Federal da Fronteira Sul, Chapecó, SC, Brasil.
,
ELOISA LEHR FILIPPI CHIELLA 
2   Universidade Comunitária da Região de Chapecó, Chapecó, SC, Brasil.
,
RAPHAELA PASSUELLO 
2   Universidade Comunitária da Região de Chapecó, Chapecó, SC, Brasil.
,
ALINE MANICA 
2   Universidade Comunitária da Região de Chapecó, Chapecó, SC, Brasil.
,
JULIANA CRISTINA SCHMIDT 
2   Universidade Comunitária da Região de Chapecó, Chapecó, SC, Brasil.
› Author Affiliations
› Further Information
  Permissions and Reprints

▪ RESUMO

Introdução:

A lipoenxertia é um enxerto autólogo de células do tecido celular subcutâneo, que pode ser utilizada como técnica complementar na reconstrução mamária. Diante disso, a criopreservação de células-tronco mesenquimais provenientes de tecido adiposo (CTDAs) poderia ser uma maneira de realizar a coleta em um tempo cirúrgico e após realizar a lipoenxertia de forma fracionada. O dimetilsulfóxido (DMSO) é um criopreservante utilizado em pesquisas com células, porém é potencialmente tóxico, o que impossibilitaria a utilização de CTDAs criopreservadas na prática clínica. Novos criopreservantes celulares, sem toxicidade, vêm sendo descritos na literatura científica experimental, como as substâncias L-prolina e trealose. Com isso, esse trabalho teve como objetivo avaliar a viabilidade de CTDAs criopreservadas com a combinação de L-prolina e trealose, em um período de até 90 dias.

Método:

Estudo experimental, no qual foram obtidas amostras de lipoaspirado provenientes de 9 pacientes. A fração celular foi processada e congelada com L-prolina (1,5M) + trealose (0,2M), ou com DMSO + soro fetal bovino (SFB), como controle. Após 30 e 90 dias, as amostras foram descongeladas e a viabilidade celular foi avaliada pela técnica de MTT.

Resultados:

A análise das CTDAs, após 1 e 3 meses de congelamento, indicou que as amostras tratadas com L-prolina + trealose apresentaram viabilidade semelhante àquelas preservadas com DMSO e SFB (p=0,444).

Conclusão:

A associação de L-prolina e trealose manteve CTDA viáveis por 30 e 90 dias de congelamento, podendo ser uma alternativa como criopreservante celular sem toxicidade e viabilizando o uso de lipoenxertia seriada.

Descritores:

Trealose - Lipectomia - Neoplasias da mama - Células-tronco mesenquimais - Adipócitos - Prolina

Instituição: Universidade Comunitária da Região de Chapecó (Unochapecó), Chapecó, SC, Brasil.




Publication History

Received: 15 May 2023

Accepted: 20 August 2023

Article published online:
20 May 2025

© 2024. The Author(s). This is an open access article published by Thieme under the terms of the Creative Commons Attribution 4.0 International License, permitting copying and reproduction so long as the original work is given appropriate credit (https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/)

Thieme Revinter Publicações Ltda.
Rua do Matoso 170, Rio de Janeiro, RJ, CEP 20270-135, Brazil

Bibliographical Record
MARCELO MORENO, ELOISA LEHR FILIPPI CHIELLA, RAPHAELA PASSUELLO, ALINE MANICA, JULIANA CRISTINA SCHMIDT. Criopreservação de células-tronco mesenquimais do tecido adiposo: Uma alternativa para lipoenxertia seriada na reconstrução mamária. Revista Brasileira de Cirurgia Plástica (RBCP) – Brazilian Journal of Plastic Surgery 2024; 39: 217712352023rbcp0819pt.
DOI: 10.5935/2177-1235.2023RBCP0819-PT
 

  • REFERENCES

  • 1 Fanakidou I, Zyga S, Alikari V, Tsironi M, Stathoulis J, Theofilou P. Mental health, loneliness, and illness perception outcomes in quality of life among young breast cancer patients after mastectomy: the role of breast reconstruction. Qual Life Res 2018; 27 (02) 539-543
    CrossrefPubMedSearch in Google Scholar
  • 2 Brasil. Presidência da República. Lei Nº 9.797, de 6 de maio de 1999. Dispõe sobre a obrigatoriedade da cirurgia plástica reparadora da mama pela rede de unidades integrantes do Sistema Único de Saúde - SUS nos casos de mutilação decorrentes de tratamento de câncer. Brasília: Presidência da República; 1999. . [Internet]. Disponível em: https://legislacao.presidencia.gov.br/atos/?tipo=LEI&numero=9797&ano=1999&ato=b04cXRE9keNpWT174
    Search in Google Scholar
  • 3 Brasil. Presidência da República. Lei Nº 12.802, de 24 de abril de 2013. Altera a Lei nº 9.797, de 6 de maio de 1999, que “dispõe sobre a obrigatoriedade da cirurgia plástica reparadora da mama pela rede de unidades integrantes do sistema único de saúde - SUS nos casos de mutilação decorrentes de tratamento de câncer”, para dispor sobre o momento da reconstrução mamária. [Internet]. Brasília: Presidência da República; 2013. . Disponível em: https://legislacao.presidencia.gov.br/atos/?tipo=LEI&numero=12802&ano=2013&ato=97cATRU50MVpWTabf
    Search in Google Scholar
  • 4 Brasil. Ministério da Saúde. Portaria GM/MS nº 127, de 13 de fevereiro de 2023. Institui estratégia excepcional de ampliação do acesso à reconstrução mamária em caso de mulheres com diagnóstico de câncer de mama, no âmbito do Sistema Único de Saúde -SUS. [Internet]. Brasília: Ministério da Saúde; 2023. . Disponível em: https://www.gov.br/saude/pt-br/composicao/saes/legislacao/portaria-gm-ms-no-127-de-13-de-fevereiro-de-2023/view
    Search in Google Scholar
  • 5 Loibl S, Poortmans P, Morrow M, Denkert C, Curigliano G. Breast cancer. Lancet 2021; 397 (10286): 1750-1769
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 6 Petrucelli N, Daly MB, Pal T. BRCA1- and BRCA2-Associated Hereditary Breast and Ovarian Cancer: Synonym: BRCA1- and BRCA2-Associated HBOC [Internet]. 2022 [acesso 2022 nov 11]. Disponível em: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK1247/
    Search in Google Scholar
  • 7 Tan SS, Loh W. The utility of adipose-derived stem cells and stromal vascular fraction for oncologic soft tissue reconstruction: Is it safe? A matter for debate. Surgeon 2017; 15 (04) 186-189
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 8 Stumpf CC, Zucatto ÂE, Cavalheiro JAC, de Melo MP, Cericato R, Damin APS. et al. Oncologic safety of immediate autologous fat grafting for reconstruction in breast-conserving surgery. Breast Cancer Res Treat 2020; 180 (02) 301-309
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 9 Krastev TK, Schop SJ, Hommes J, Piatkowski AA, Heuts EM, van der Hulst RRWJ. Meta-analysis of the oncological safety of autologous fat transfer after breast cancer. Br J Surg 2018; 105 (09) 1082-1097
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 10 He X, Zhang J, Luo L, Shi J, Hu D. New Progress of Adipose-derived Stem Cells in the Therapy of Hypertrophic Scars. Curr Stem Cell Res Ther 2020; 15 (01) 77-85
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 11 Zuk P. Adipose-Derived Stem Cells in Tissue Regeneration: A Review. Int Sch Res Notices 2013; 2013: 1-35
    Search in Google Scholar
  • 12 Moreno M, Schmidt JC, Gazzoni CD, Dal-Magro L, Bonadiman BDSR, Kosvoski GC. et al. Viability of mesenchymal stem cells of adipose tissue from human liposuction. Rev Bras Cir Plást 2021; 36 (01) 9-14
    Search in Google Scholar
  • 13 da Silva A, do Prado J, Pignataro J, Moreno M. Lipoenxertia. Bagnoli F, Postiglione F, Palermo F, Pedrini JL, Freitas Júnior R, Marques V. Mastologia: do diagnóstico ao tratamento. 2ª. Goiânia: Conexão Soluções Corporativas; 2022
    Search in Google Scholar
  • 14 Arshad Z, Karmen L, Choudhary R, Smith JA, Branford OA, Brindley DA. et al. Cell assisted lipotransfer in breast augmentation and reconstruction: A systematic review of safety, efficacy, use of patient reported outcomes and study quality. JPRAS Open 2016; 10: 5-20
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 15 Piffer A, Aubry G, Cannistra C, Popescu N, Nikpayam M, Koskas M. et al. Breast Reconstruction by Exclusive Lipofilling after Total Mastectomy for Breast Cancer: Description of the Technique and Evaluation of Quality of Life. J Pers Med 2022; 12 (02) 153
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 16 Goh BC, Thirumala S, Kilroy G, Devireddy RV, Gimble JM. Cryopreservation characteristics of adipose-derived stem cells: maintenance of differentiation potential and viability. J Tissue Eng Regen Med 2007; 1 (04) 322-324
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 17 Lee JE, Kim I, Kim M. Adipogenic differentiation of human adipose tissue-derived stem cells obtained from cryopreserved adipose aspirates. Dermatol Surg 2010; 36 (07) 1078-1083
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 18 Wang C, Xiao R, Cao YL, Yin HY. Evaluation of human platelet lysate and dimethyl sulfoxide as cryoprotectants for the cryopreservation of human adipose-derived stem cells. Biochem Biophys Res Commun 2017; 491 (01) 198-203
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 19 Kim IH, Yang JD, Lee DG, Chung HY, Cho BC. Evaluation of centrifugation technique and effect of epinephrine on fat cell viability in autologous fat injection. Aesthet Surg J 2009; 29 (01) 35-39
    CrossrefPubMedSearch in Google Scholar
  • 20 Frazier TP, Gimble JM, Devay JW, Tucker HA, Chiu ES, Rowan BG. Body mass index affects proliferation and osteogenic differentiation of human subcutaneous adipose tissue-derived stem cells. BMC Cell Biol 2013; 14: 34
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 21 Efimenko AY, Kochegura TN, Akopyan ZA, Parfyonova YV. Autologous Stem Cell Therapy: How Aging and Chronic Diseases Affect Stem and Progenitor Cells. Biores Open Access 2015; 4 (01) 26-38
    CrossrefPubMedSearch in Google Scholar
  • 22 Zhang TY, Tan PC, Xie Y, Zhang XJ, Zhang PQ, Gao YM. et al. The combination of trehalose and glycerol: an effective and non-toxic recipe for cryopreservation of human adipose-derived stem cells. Stem Cell Res Ther 2020; 11 (01) 460
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 23 Toledo LS, Mauad R. Fat injection: a 20-year revision. Clin Plast Surg 2006; 33 (01) 47-53
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 24 Piccotti F, Rybinska I, Scoccia E, Morasso C, Ricciardi A, Signati L. et al. Lipofilling in Breast Oncological Surgery: A Safe Opportunity or Risk for Cancer Recurrence?. Int J Mol Sci 2021; 22 (07) 3737
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 25 Becker H, Vazquez OA, Rosen T. Cannula Size Effect on Stromal Vascular Fraction Content of Fat Grafts. Plast Reconstr Surg Glob Open 2021; 9 (03) e3471
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 26 Tong Y, Liu P, Wang Y, Geng C, Han X, Ma J. et al. The Effect of Liposuction Cannula Diameter on Fat Retention-Based on a Rheological Simulation. Plast Reconstr Surg Glob Open 2018; 6 (11) e2021
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 27 Biazus JV, Falcão CC, Parizotto AC, Stumpf CC, Cavalheiro JA, Schuh F. et al. Immediate Reconstruction with Autologous fat Transfer Following Breast-Conserving Surgery. Breast J 2015; 21 (03) 268-275
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 28 Condé-Green A, de Amorim NF, Pitanguy I. Influence of decantation, washing and centrifugation on adipocyte and mesenchymal stem cell content of aspirated adipose tissue: a comparative study. J Plast Reconstr Aesthet Surg 2010; 63 (08) 1375-1381
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 29 Coleman SR. Long-term survival of fat transplants: controlled demonstrations. Aesthetic Plast Surg 1995; 19 (05) 421-425
    CrossrefPubMedSearch in Google Scholar
  • 30 Ladeira PRS, Isaac C, Nakamura YM, Tutihashi RMC, Paggiaro AO, Ferreira MC. Cultivo de células-tronco derivadas de tecido adiposo: uma análise crítica. Rev Med (São Paulo) 2012; 91 (04) 246-252
    Search in Google Scholar
  • 31 Irioda AC. Avaliação da integridade das células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo humano após o bioprocesso de criopreservação [Dissertação de mestrado]. Curitiba: Universidade Federal do Paraná; 2010. . Disponível em: http://hdl.handle.net/1884/26521
    Search in Google Scholar
  • 32 De Rosa A, De Francesco F, Tirino V, Ferraro GA, Desiderio V, Paino F. et al. A new method for cryopreserving adipose-derived stem cells: an attractive and suitable large-scale and long-term cell banking technology. Tissue Eng Part C Methods 2009; 15 (04) 659-667
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 33 Ray SS, Pramanik K, Sarangi SK, Jain N. Serum-free non-toxic freezing solution for cryopreservation of human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells. Biotechnol Lett 2016; 38 (08) 1397-1404
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 34 Ginani F, Soares DM, Barboza CAG. Influência de um protocolo de criopreservação no rendimento in vitro de células-tronco derivadas do tecido adiposo. Rev Bras Cir Plást 2012; 27 (03) 359-363
    Search in Google Scholar
  • 35 Verheijen M, Lienhard M, Schrooders Y, Clayton O, Nudischer R, Boerno S. et al. DMSO induces drastic changes in human cellular processes and epigenetic landscape in vitro. Sci Rep 2019; 9 (01) 4641
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 36 Kennelly P, Rodwell V. Aminoácidos e Peptídeos. Rodwell VW, Bender D, Botham KM, Kennelly PJ, Weil PA. Bioquímica Ilustrada de Harper. 31ª. Porto Alegre: AMGH Editora; 2021
    Search in Google Scholar
  • 37 Dou M, Lu C, Sun Z, Rao W. Natural cryoprotectants combinations of l-proline and trehalose for red blood cells cryopreservation. Cryobiology 2019; 91: 23-29
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 38 Dovgan B, Miklavčič D, Knežević M, Zupan J, Barlič A. Intracellular delivery of trehalose renders mesenchymal stromal cells viable and immunomodulatory competent after cryopreservation. Cytotechnology 2021; 73 (03) 391-411
    PubMedSearch in Google Scholar
  • 39 Dalmagro JP. Isolamento e caracterização das células-tronco mesenquimais provenientes do tecido adiposo e avaliação da sua viabilidade tecidual após criopreservação [Monografia]. Porto Alegre: Universidade Federal do Rio Grande do Sul; 2019
    Search in Google Scholar
  • 40 Lenoch CY. Estratégias para criopreservação de células tronco mesenquimais de tecido adiposo bovino [Dissertação de mestrado]. Lages: Universidade do Estado de Santa Catarina; 2015
    Search in Google Scholar
  • 41 Gonda K, Shigeura T, Sato T, Matsumoto D, Suga H, Inoue K. et al. Preserved proliferative capacity and multipotency of human adipose-derived stem cells after long-term cryopreservation. Plast Reconstr Surg 2008; 121 (02) 401-410
    PubMedSearch in Google Scholar