Über den Stoffwechsel von Organkulturen der Cornea in TC 199 mit Zusatz von Dextran 500 oder HAES 450

Zusammenfassung

Schweinehornhäute wurden 20 Tage lang in TC 199 Kulturmedium bei 21°C gelagert. Dem TC 199 wurden 10% frisches Schweineserum, Antibiotika und, um die Quellung der Corneae zu verhindern, 10% Dextran 500 oder Hydroxyäthylstärke HAES 450 zugesetzt. Das Molekulargewicht der Zusätze betrug 500000 bzw. 450000 Dalton. Sie verhinderten die Quellung durch ihre osmotischen Kräfte. Der Wassergehalt der kultivierten Corneae lag mit HAES 450 bei 80,6±0,5% und mit Dextron 500 bei 76,4±2,0%. Nach einer Lagerung von 12 bis 16 Tagen rundeten sich die Epithelzellen der kultivierten Corneae ab und wurden abgeschilfert. Das Endothel zeigte Vakuolen. Der Stoffwechsel der kultivierten Hornhäute wurde durch Messung der Glukose- und Laktatspiegel I im Corneaepithel -Stroma und im Kulturmedium sowie I durch die Bestimmung des Gehalts an ATP, ADP und Glykogen im Epithel untersucht. Die kultivierten Corneae verbrauchten Glukose und bildeten Laktat. Die Glykogen- und ATP-Gehalte im Epithel fielen leicht ab, aber der Energiestatus im ATP/ADP System blieb konstant. In den HAES 450-haltigen Kulturen wurde das ganze System mit Glukose überflutet, die aus der Hydroxyäthylstärke freigesetzt wurde. Die dextranhaltigen Kulturen könnten sich als brauchbar erweisen, um menschliche Donorhornhäute ohne die störende Quellung zu lagern.

Summary

Pig corneas were stored at room temperature for 20 days in TC 199 culture medium supplemented with 10% pig blood serum, antibiotics, and to reduce swelling with 10% Dextran 500 or 10% hydroxyethyl starch HAES 450. The high molecular weight of these additions, 500,000 and 450,000 Daltons respectively, prohibited swelling by their osmotic pressure. The water content of the cultured corneas was 80.6±0.5% with HAES 450 and 76.4±2.0% with Dextran 500. The epithelial cells of the cultured cornea rounded and desquamated after 12 to 16 days of culture. The endothelium showed vacuoles. The metabolism of the cultured corneas was measured by glucose and lactate levels in the epithelium, the stroma, and the medium as well as by the glycogen, ATP, and ADP content in the corneal epithelium. The cultured corneas consumed reasonable amounts of glucose and produced lactate. The glycogen content and the ATP levels decreased slightly, but the ATP/ADP ratio showed a good energy state. In the cultures containing HAES 450 the entire system was flooded with glucose released from hydroxyethyl starch. The Dextran 500 culture system could prove suitable for culturing human donor material without swelling.